actividad enzimatica

PRÁCTICA 4. ESTUDIO DE ALGUNOS PARÁMETROS CINÉTICOS DE LA
FOSFATASA ALCALINA DE INTESTINO DE RATA

ANY CAROLINA BETANCOURT ORTEGA
JEISSON CATAÑO OCHOA
GUSTAVO ENRIQUE GONZALEZ GARCÍA
JAHIR EDUARDO PÉREZ PARADA
JUAN PABLO RENDÓN CARDONA
JULIANA SOTO CARDONA

BIOLOGÍA DE LA CÉLULA I
JAIME IVÁN RODRIGUEZ
JEFE DE ÁREA

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
FACULTAD DE MEDICINA
MEDICINA
MEDELLÍN2014

TABLA DE CONTENIDO
I.

EFECTOS DEL PH
1. MARCO TEÓRICO....................................................................................................... 6

2.

3.
4.
5.
II.

1.1. CINÉTICA ENZIMÁTICA…………………………………………………………………………………….6
1.2. FOSFATASA ALCALINA……………………………………………………………………………………..6
1.3. ACTIVIDAD ENZIMÁTICA Y PH………………………………………………………………………….7
METODOLOGÍA2.1. MATERIALES Y REACTIVOS………………………………………………………………………………8
2.1.1. MATERIALES……………………………………………………………………………………….8
2.1.1.1. ESPECTOFOTÓMETRO…………………………………………………………………..8
2.1.1.2. CUBETAS DE POLIESTILÉNO…………………………………………………………..8
2.1.1.3. BAÑO DE MARÍA…………………………………………………………………………..8
2.1.1.4. PIPETA DE REPETICIÓN…………………………………………………………………8
2.1.1.5. NEVERA DE ICOPOR………………………………………………………………………92.1.1.6. SERVILLETAS…………………………………………………………………………………9
2.1.1.7. TUBO DE ENSAYO…………………………………………………………………………9
2.1.2. REACTIVOS…………………………………………………………………………………………9
2.2. PROCEDIMIENTOS…………………………………………………………………………………………10
RESULTADOS……………………………………………………………………………………………………….12
ANALISIS……………………………………………………………………………………………………………..14
ANEXOS……………………………………………………………………………………………………………….15

EFECTOS DE LATEMPERATURA
1. MARCO TEÓRICO ............................................................................................ 18
2. RESULTADOS……………………………………………………………………………………………………….19
3. ANALISIS……………………………………………………………………………………………………………..21
4. ANEXOS……………………………………………………………………………………………………………….22

III.

EFECTOS DE LA CONCENTRACIÓN
1. MARCO TEÓRICO............................................................................................ 25
2.
3.
4.
5.

IV.

PROCEDIMIENTOS……………………………………………………………………………………………….28
RESULTADOS……………………………………………………………………………………………………….30
ANALISIS……………………………………………………………………………………………………………..33
ANEXOS………………………………………………………………………………………………………………35

EFECTO DEL FOSFATO INORGÁNICO
1. MARCO TEÓRICO............................................................................................ 43
1.1. ENZIMAS…..…………………………………………………………………………………………………………43
1.2. ACTIVIDAD ENZIMÁTICA…………………………………………………………………………………….43
1.3. INHIBICIÓN ENZIMÁTICA…………………………………………………………………………………….44
1.4. INHIBICIÓN IRREVERSIBLE…………………………………………………………………………………..44

2

1.5. INHIBICIÓN REVERSIBLE………………………………………………………………………………………44
1.5.1. INHIBICIÓNCOMPETITIVA…………………………………………………………………………….44
1.5.2. INHIBICIÓN INCOMPETITIVA…………………………………………………………………………45
1.5.3. INHIBICIÓN NO COMPETITIVA………………………………………………………………………45
2. METODOLOGÍA………………………………………………………………………………………………….46
2.1. PROCEDIMIENTOS………………………………………………………………………………………………46
3. RESULTADOS………………………………………………………………………………………………………48
4. ANALISIS……………………………………………………………………………………………………………..51
5. ANEXOS………………………………………………………………………………………………………………52CONCLUSIONES
REFERENCIAS
FICHAS DE SEGURIDAD

GRÁFICOS
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.

DIAGRAMA DE FLUJO ………………………………………………………..11
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA……………………………………………………..13
TEMPERATURA IDEAL…………………………………………………….....18
TEMPERATURA EXPERIMENTAL…………………………………………..20
CONCENTRACIÓN IDEAL…………………………………………………….26
LINEWEAVER…………………………………………………………………...27
DIAGRAMA DE FLUJO………………………………………………………..29
MICHAELIS………………………………………………………………………31
LINEWEAVER……………………………………………………………………32
DIAGRAMA DE FLUJO………………………………………………………...47
MICHAELIS………………………………………………………………………48
LINEWEAVER……………………………………………………………………49

TABLAS
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

TABLA 1…………………………………………………………………………….12
TABLA 2…………………………………………………………………………….12
TABLA...