Adn recombinante

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1. el adn recombinante, o adn recombinado, es una molécula de adn artificial formada de manera deliberada in vitro por la unión de secuencias de adn provenientes de dos organismos de especies diferentes que normalmente no se encuentran juntos. al introducirse este adn recombinante en un organismo se produce una modificación genética que permite la adición de un nuevo adn al organismo conllevandoa la modificación de rasgos existentes o la expresión de nuevos rasgos. la producción de una proteína no presente en un organismo determinado y producidas a partir de adn recombinante se llaman proteínas recombinantes.
el proceso consiste en tomar una molécula de adn de un organismo, sea un virus, planta o una bacteria y en el laboratorio manipularla y ponerla de nuevo dentro de otro organismo.esto se puede hacer para estudiar la expresión de un gen, para producir proteínas en el tratamiento de una enfermedad genética, vacunas o con fines económicos y científicos.[1]

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2. una enzima de restricción (o endonucleasas de restricción) es aquella que puede reconocer una secuencia característica de nucleótidos dentro de una molécula de adn y cortar el adn en ese punto en concreto,llamado sitio o diana de restricción, o en un sitio no muy lejano a éste, dependiendo de la enzima. los sitios de restricción cuentan con entre 4 y 12 pares de bases, con las que son reconocidos.
el mecanismo de corte de dna se realiza a través de la ruptura de dos enlaces fosfodiéster en la doble hebra, lo que da lugar a dos extremos de dna. éstos pueden ser romos (cuando los enlaces rotos coinciden)o cohesivos/escalonados. estos últimos tienen tendencia a volver a unirse de modo espontáneo, ya que los extremos se pueden unir a otros extremos coincidentes que pueda haber en la cercanía

corte de ecori dejando extremos cohesivos.

restricción de smai dejando extremos romos.

3. los plásmidos, vectores o también llamados plasmidios, son moléculas de adn extracromosómico circular olineal que se replican y transcriben independientes del adn cromosómico. están presentes normalmente en bacterias, y en algunas ocasiones en organismos eucariotas como las levaduras



dibujo esquemático de un plásmido en una bacteria: en rojo, el adn del cromosoma; en azul, los plásmidos.

los plásmidos a menudo contienen genes o paquetes de genes que le confieren una ventaja selectiva lo cualles da la habilidad de hacer a la bacteria, resistente a los antibióticos.
cada plásmido contiene al menos una secuencia de adn que sirve como un origen de replicación u ori (un punto inicial para la replicación del adn), lo cual habilita al adn para ser duplicado independientemente del adn cromosomal. los plásmidos de la mayoría de las bacterias son circulares, pero también se conocen algunoslineales, los cuales reensamblan superficialmente los cromosomas de la mayoría de eucariotes.

5. los plásmidos bacterianos son los más usados, debido a lo fácil que resulta manipularlos en un tubo de ensayo. para ello se utilizan las llamadas enzimas de restricción, que cortan el adn del plásmido sólo en sitios determinados muy precisos. algunas de esas enzimas cortan por secuencias denucleótidos que facilitan la labor de ensamblaje con nuevos fragmentos de adn que, previamente, han sido cortados con dicha enzima. el paso final es soldar ambos fragmentos para obtener el plásmido recombinante, lo que se consigue con otras enzimas llamadas ligasas. una vez obtenido el plásmido recombinante comienza el proceso de clonación. el primer paso es volver a introducir el plásmido en la bacteria, unproceso que se puede conseguir por ejemplo permeabilizando la membrana celular. el segundo paso es realizar un cultivo bacteriano para incrementar el número de bacterias que han incorporado el plásmido a su estructura.
metodo de fabricar un vector de plasmido recombinante deseado.comprende: a) cortar un primer plasmido progenitor con una enzima de restriccion para dar un primer fragmento de...
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