Aflps

Agronomía Costarricense 29(2): 57-71. ISSN:0377-9424 / 2005
www.mag.go.cr/rev_agr/inicio.htm
www.cia.ucr.ac.cr

IDENTIFICACIÓN Y MAPEO DE AFLPS LIGADOS AL GEN DE RESISTENCIA
AL PVX EN Solanum commersonii 1
Mónica Blanco*, Roberto Valverde2/*
Palabras clave: Papa, Solanum commersonii, resistencia a virus, Virus X de la papa, PVX, AFLP, BSA, ELISA.
Keywords: Potato, Solanum commersonii,virus resistance, Potato Virus X, PVX, AFLP, BSA, ELISA.
Recibido: 16/05/05

Aceptado: 14/07/05

RESUMEN

ABSTRACT

Solanum commersonii es una especie silvestre de papa considerada como una fuente de
genes de resistencia al PVX. Para identificar
marcadores moleculares relacionados con los
genes de resistencia a este virus, se realizó un
análisis en el que se combinó la técnica de BSAcon el uso de AFLPs. Del cruce de 2 padres
heterocigotos y resistentes al PVX, provenientes de una F1, se obtuvo una F2. La población
fue inoculada con el PVXMS y 30 días después
mediante un ELISA, la progenie fue dividida
en individuos infectados y no infectados con
el PVX MS; a estos 2 grupos se les realizó un
BSA. El ADN de los individuos resistentes fue
mezclado aparte del ADN de losindividuos
susceptibles y con la ayuda de AFLPs se logró
identificar 22 combinaciones de imprimadores
que produjeron bandas específicas relacionadas con el carácter de resistencia al PVX. Las
combinaciones de imprimadores seleccionadas
fueron utilizadas para evaluar cada uno de los
individuos de la F2 en forma independiente.
Producto de este análisis se obtuvo 63 bandas
polimórficasrelacionadas al carácter de resistencia, cuya información fue introducida en el
programa MAPRF6. Como resultado se obtuvo
4 grupos de ligamiento. Se encontró un RGA,
obtenido en otro estudio que co-segrega (0 cM)

Identification and mapping of AFLPs
linked to the PVX resistance gene in Solanum
commersonii. Solanum commersonii has been
identified as a source of resistance to PVX.
In order toidentify molecular markers related
to resistant genes a combination of BSA and
AFLP techniques was used. An F2 population
was obtained from crossing two F1 heterozygous
parents resistant to PVX. The F2 was inoculated
with the PVXMS. Thirty days after inoculation,
an ELISA test was carried out, by which the
progeny was divided into resistant and susceptible
individuals to the PVXMS; with thisinformation
a BSA was conducted on both groups. DNA
from all resistant individuals was subjected to
a BSA aimed by AFLPs. The BSA allowed the
identification of resistance-specific bands with
22 out of 64 primer combinations. Those primer
combinations selected were used to analyze
each individual of the whole F2 population. The
analysis yielded 63 polymorphic bands related to
resistance; withthose bands information and the
MAPRF6 program, it was possible to generate
4 linkage groups with a total of 23 markers,
including some RGAs from another study. In one
of the linkage groups, an RGA is co-segregating
(0 cM) with the extreme resistance gene (Rx)
locus and AFLPs 42 and 39 are surrounding the

1/

2/

Este trabajo forma parte de la tesis de M.Sc. de
la autora. Programa deEstudios de Posgrado en
Ciencias Agrícolas y Recursos Naturales. Facultad
de Ciencias Agroalimentarias. Universidad de Costa
Rica. San José, Costa Rica.

*

Autor para correspondencia. Correo electrónico:
robertov@cariari.ucr.ac.cr
Centro de Investigaciones Agronómicas Universidad
de Costa Rica.

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AGRONOMÍA COSTARRICENSE

con el locus del gen de resistencia extrema (Rx) y
losAFLPs 42 y 39 que están rodeando el mismo
locus a 22,6 cM o más. La información obtenida será básica para implementar programas de
selección asistida por marcadores moleculares
en el mejoramiento genético.

R x locus at a distance of 22.6 cM or more. These
data will provide the foundation for molecular
marker assisted selection in potato breeding
programs.

INTRODUCCIÓN

este fin...