amilasa

Instituto Tecnológico Superior De Irapuato
Extensión Purísima Del Rincón.


Ingeniera Metabólica.


José de Jesús Medina Vargas


Trabajo de:
REPORTE de PRÁCTICA DIGESTIÓN DE NUTRIENTES (AMILASA SALIVAL)
.

Docente:
Ing. José Jesús Flores Sierra.


Martes 9 de septiembre del 2014






Introducción


Las células eucariotas pueden contener varios o muchoscromosomas, según las especies. Cada cromosoma contiene una molécula muy grande de ADN. La longitud total de todo el ADN presente en una sola célula de mamífero se ha calculado que debe ser 2 metros, admitiendo que es duplo helicoidal. Esto equivale a unos 5,5 x 109 pares de bases. La organización ultra estructural del ADN en el núcleo de las células eucariotas es muy compleja, y experimenta cambiosespectaculares durante el ciclo celular. Las mitocondrias de las células eucariotas contienen un ADN que es completamente diferente del hallado en el núcleo. El ADN mitocondrial es de doble hebra y circular, y tiene un peso molecular de tan solo 10000. El ADN mitocondrial difiere también del nuclear de la célula en su composición en bases. En las células somáticas existen de cuatro a seis moléculas deADN por cada mitocondria, pero el total del ADN mitocondrial es mucho menos del 1% del total del ADN contenido por la célula.

Conceptos clave (desarrollarlos):

Cromosoma
Un gen
El ácido desoxirribonucleico
Proteínas asociadas al DNA
Soluciones en el proceso de purificación del DNA.

- Solución de lisis:
- Proteasa:
- Alcohol:


Objetivo:
Extraer ADN eucariota mediante lisiscelular.

Material:
- Frutas pulposas (entre más madura esté, mejor).
- Papel toalla o filtros para cafetera.
- Agitador (cuchara, tenedor, varilla de cristal…).
- Vaso de precipitado de 250 mL
- Mortero




Reactivos:
- Detergente líquido.
- Sal.
- Ablandador de carnes.
- Alcohol etílico


Procedimiento:

- Macerar la fruta con el mortero (asegurarse de homogeneizar todo elmaterial vegetal)
- Colocar un par de gotas del líquido lavatrastes y seguir homogeneizando por 2 minutos más.
- Filtrar el contenido del mortero sobre un filtro de café o con el papel filtro del laboratorio.
- Agregar jugo filtrado, una pizca de ablandador de carne y mezclar muy suavemente.
- Agregar una pizca de sal al jugo
- Inclinar el vaso de precipitado y veter muy lentamente el etanolal jugo (que resbale por la pared del vaso).
- No mezclar las fases del jugo y del etanol.
- Apuntar sus resultados.

RESULTADOS:
CONCLUIÓN:
CUESTIONARIO:

1.- ¿Por qué es importante homogeneizar la pulpa para la extracción de ADN?
2.- ¿Para qué se usa el jabón líquido?
3.- ¿Qué función tiene el ablandador de carne en la extracción de ADN?
4.-.- ¿Qué función la sal en la extracción deADN?









Notas:
• Si se quiere realizar una extracción "profesional" puedes agregar enzimas que lo puede hacer mejor, y el producto que resultaría seria pura.
• Cuando añadas el alcohol frío debes hacerlo de forma que resbale por las paredes del tubo para que forme una capa sobre el filtrado. Para realizarlo mejor puedes utilizar la varilla de vidrio o una cucharilla para ayudarte.• Si se expone por mucho tiempo la muestra vegetal a rayos ultravioletas, esto provoca daños sobre la estructura del ADN, o aplicar ciertos conservantes que puedan provocar efectos sobre la cadena del ADN.

Resultados y explicación
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realizaañadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN.
Para realizar una extracción pura ocurrirá que el detergente contiene lauril sulfato de sodio, el cual limpia los trastes removiendo grasas y proteínas. Éste actúa de la misma manera en el protocolo de extracción de ADN, separando las grasas (lípidos) y las proteínas que constituyen las membranas que rodean la célula...