Análisis Cualitativo De Aminoácidos Por Cromatografía En Papel

PRACTICA NO. 2
CROMATOGRAFIA EN PAPEL II
ANALISIS CUALITATIVO DE AMINOÁCIDOS POR CROMATOGRAFIA EN PAPEL

Yancy Juan (201080037), María Isabel Amorín (201013626)

Departamento de Análisis Instrumental, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos de Guatemala, Carrera de Química

RESUMEN
Por medio de la cromatografía en papel, se espero separar y aislar aminoácidos;y también comprender los mecanismos relacionadas con la cromatografía. Utilizando esta técnica de cromatografía en papel, que es un tipo de cromatografía de reparto, se realizo un análisis cualitativo de distintos aminoácidos. Para la revelación, se utilizo ninhidrina que produjo una coloración morada/café en presencia de aminoácidos.

MATERIALES
Papel filtro Watman Qualitative No. 1,camara cromatografica, capilares adelgazados, Tijeras, estufa electrica, papel pH (escala de 1-14), pipetas Pasteur, Probeta de 100 y 10ml, aminoácidos, acetato de amonio, acetonitrilo, acido acético 50%, ninhidrina en solución (1ml/ml de acetona).

METODOLOGIA
Por medio de la cromatografía en papel, se llevo a cabo un análisis cualitativo de aminoácidos. La muestra se sembro en el papelcromatográfico y se dejo que subiera la fase estacionaria (desplazado por la solubilidad asi como por la adosorcion). Fue necesario el uso de la slolucion tampón debido a las características de los aminoácidos, para perminitir un desplazamiento mas efectivo entre las fases. Para poder ver la separación de los aminoácidos en la placa cromatografía, fue necesario el uso de ninhidrina como revelador.RESULTADOS:

Fuente: Datos Experimentales obtenidos en el Laboratorio de Fisicoquímica, Edificio T12, USAC

Estándar | Distancia recorrida |
Aminoácido | Leucina | 5.5 |
| Glutamina | 3.0 |
| Valina | 5.0 |
| Taurina | 1.0 |
| Fase móvil | 6.0 |
Tabla No.1: Distancia recorrida por los estándares (aminoácidos) y la fase móvil
cm = centímetros
Fuente: Datos Experimentalesobtenidos en el Laboratorio de Fisicoquímica, Edificio T-12, USAC.

Estándar | Rf= ab |
Aminoácido | Leucina | 0.9167 |
| Glutamina | 0.5 |
| Valina | 0.8334 |
| Taurina | 0.1667 |

a= distancia recorrida por muestra estándar
b= frente del solvente
Fuente: Datos Experimentales obtenidos en el Laboratorio de Fisicoquímica, Edificio T-12 USAC.


DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Loscálculos de Rf y de las distancias recorridas por los diferentes aminoácidos se puede inferir la polaridad de la molécula. A mayor polaridad menos distacia recorrerá, a la inversa una mayor distancia recorrida indicará menor polaridad, por tener afinidad con la fase móvil.
La leucina es un aminoácido apolar y su radical libre es CH2 -CH-(CH3)2. La apolaridad de esta molécula se puede observar en losresultados dado que la leucina recorrió una distancia de 5.5 cm la distancia más larga recorrida por las muestras. (Anexos, figura 1)
A su vez la valina corresponde a uno de los aminoácidos apolares lo que se confirma al observar el resultado de la distancia recorrida de dicho aminoácido siendo esta el segundo valor más alto de los aminoácidos utilizados con 5.0 cm. La distancia recorrida esbastante grande debido a que esta molécula tiene más afinidad por la fase móvil apolar que por la fase estacionaria (celulosa) polar. (Anexos, figura 2)
La glutamina por el contrario es un aminiácido polar, polaridad que se puede inferir observando que la distancia recorrida fue de solamente 3.0 cm, esto debido a que al ser una molécula polar tuvo más afinidad con la fase estacionaria (celulosa, polar)que con la fase móvil. (Anexos figura 3). Lo mismo ocurre con la taurina que no se trata de un aminoácido como tal, se clasifica como uno pero no tiene la característica de poseer un grupo carboxilo. Esta realmente es un ácido sulfónico. La taurina tiene una alta polaridad además de ser un un zwitterión,  es un compuesto químico que es eléctricamente neutro pero que tiene cargas formales...