Biologia molecular ejercicios

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  • Publicado : 29 de mayo de 2011
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. Responde verdadero o falso según corresponda. Justifica tus respuestas.
1. Las enzimas de restricción reconocen secuencias de nucleótidos en el ADN. VERDADERO
2. La única técnica empleada para originar fragmentos de ADN es la que se basa en la utilización de enzimas de restricción. FALSO, pueden emplearse otras técnicas de rotura mecánica (por ejemplo la sonicación: disgregación demoléculas de ADN por ondas ultrasónicas).
3. Las enzimas de restricción rompen la doble hélice del ADN en lugares específicos o cerca de ellos. VERDADERO
4. Los fragmentos de ADN pueden ser incorporados a plásmidos o virus que actúen como vectores. VERDADERO
5. Los plásmidos extracromosómicos no son vehículos corrientes utilizados para clonación. FALSO. Son vehículos declonación debido a su capacidad de mantenerse a sí mismo y replicarse en células huésped procariotas.
6. Las enzimas de restricción ofrecen la posibilidad de segmentar el ADN en trozos y ordenarlos en forma secuencial. VERDADERO
7. Escherichia coli es la única bacteria que produce enzimas de restricción. FALSO. La mayoría de las bacterias lo hacen.
8. Las bacterias producen enzimas derestricción para degradar el material genético extraño que entre en la célula. VERDADERO.
9. Las enzimas de restricción actúan sobre cualquier tipo de molécula. FALSO; como todas las enzimas, las de restricción son específicas, actúan sólo sobre sitios específicos de la molécula de ADN.

b. Ordenar la secuencia de hechos que se emplean en ingeniería genética:
* Transferencia del vectorcon el ADN de interés (vector recombinante) a una célula en donde se replique, proceso llamado “transformación” de la célula huésped.
* Generación de un fragmento o fragmentos de ADN que han de utilizarse o manipularse.
* Selección de aquellas células que llevan las moléculas de ADN recombinante deseado, y su replicación como clones.
* Empalme de los fragmentos de ADN formando unamolécula compuesta, ADN recombinante, que puede actuar como vector, o ser incorporado en un vector para su posterior transmisión.

Respuesta:
1-Generación de un fragmento o fragmentos de ADN que han de utilizarse.
2-Empalme de los fragmentos de ADN formando una molécula compuesta, ADN recombinado, que puede actuar como vector, o ser incorporado en un vector para su posterior transmisión.3-Transferencia del vector ADN a una célula en donde se replique, proceso llamado “transformación” de la célula huésped.
4-Selección de aquellas células que llevan las moléculas de ADN recombinante deseado, y su replicación como clones.

c. A continuación se presenta un esquema general para construir un clon de moléculas de ADN recombinante utilizando plásmidos y endonucleasas de restricción.
Observary completar los recuadros del esquema utilizando las referencias que figuran al pie del mismo.
Referencias:
Transferencia del vector a una célula huésped
Selección de las células con ADN recombinante
Clonación (replicación)
Cortes por la endonucleasa de restricción
Apareamiento y unión (ligasa)
Cromosoma huésped
Vector plasmídico
Lugares de reconocimiento por la enzima
Molécula de ADNrecombinante.
Fuente: Strickberger. Genética. Tercera edición. Ediciones Omega.

Respuesta:

Actividad 2. Análisis de caso
Se puede fotocopiar las ilustraciones de la actividad y distribuirla entre los alumnos para que recorten el gen de la Fig. 1 y abran el vector de la Fig.2 e inserten allí el gen de interés.
Algunas consideraciones a tener en cuenta antes de hacer el ejercicio:
1)Cuando se realiza el protocolo de restricción (es decir se sigue la receta para el uso de las enzimas), se pueden combinar 2 o más enzimas en un mismo tubo de ensayo, siempre y cuando la solución en la cual deben estar disueltas sea la misma.
2) Cada enzima puede cortar en algunos o en todos los sitios que le corresponde, esto depende de la cantidad de moléculas enzimáticas que se...
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