Biometria hematica

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO
COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES

ANALISIS CLINICOS

“BIOMETRIA HEMATICA”

OBJETIVO:
Practicar las técnicas más importantes del laboratorio de hematología, así como sus beneficios y la importancia de éstas a la hora de detectar enfermedades
INTRODUCCION, MATERIAL Y PROCEDIMIENTO:

El hemograma incluye la cuenta plaquetaria, cuenta leucocitaria(WBC), cuenta eritrocitaria (RBC), hemoglobina, hematocrito y los índices. La biometría hemática es el hemograma mas la cuenta diferencial.
La biometría hemática completa (BHC) es una prueba de detección básica y constituye la técnica del laboratorio que se pide con mas frecuencia. Los datos que se proporcionan constituyen información diagnostico muy valioso sobre el sistema hematológico yotras partes del cuerpo, pronostico, respuesta al tratamiento y recuperación.
Consta de una serie de pruebas que determinan el número, variedad, porcentaje, concentración y calidad de las células sanguíneas:
Determinación de hemoglobina (Hb)
Fundamento:
Es una proteína conjugada de color rojo integrantes de los eritrocitos entre un 31-34%.
Existen varios métodos para determinación como hematinaácida, hematina alcalina, oxihemoglobina, carboxihemoglobina y cianometahemoglobina; éste último es el de elección por que es estable en soluciones diluidas, porque existen en el mercado estándares de cianometahemoglobina y porque las lecturas se pueden hacer en espectrofotómetro de uso común y corriente.
La sangre se hemoliza por agregado de un agente densoactivo, con el ferrocianuro de potasiose oxidan el átomo de fierro de ferroso a férrico para producir metahemoglobina. El cianuro de potasio estabiliza la metahemoglobina pasando de cianometahemoglobina. La cloración producida es directamente proporcional a la concentración de hemoglobina presente.
Material:
Tubos de ensayo de 13 x 100 ml
Pipetas de 1ml
Pipetas de Salí
Boquillas
Gradillas
Gasa
Celdas para espectrofotómetroSangre capilar o venosa con anticoagulante.
Reactivos:
EDTA al 10 % (.07 ml por .5 ml de sangre)
Reactivo DE Drabkin:
-ferrocianuro de potasio
-cianuro de potasio
-bicarbonato de potasio
Solución estándar de cianometahemoglobina.

Procedimiento:
1.- Colocar en un tubo de ensayo 5 ml de reactivo de Drabkin
2.- Homogeneizar bien la sangre
3.- Llenar en sangre hasta la marca de la pipetade Sahli
4.-Mezclar la sangre con el disolvente
5.- Dejar Reposar 10 min. Para la formación de cianometahemoglobina
6.- leer a 540 nanómetros en el espectrofotómetro contra un blanco de reactivo.
7.- comparar con la curva calibrada de estándares.
Valores de referencia:
Mujeres: 12 -14 gr/dl
Mujeres embarazadas: 11-14 gr/dl
Hombres: 13-19gr/dl
Recién nacidos: 13.19gr/dl

Determinacióndel hematocrito
Fundamento:
El hematocrito mide el porcentaje del volumen de sangre total pero ocupado solamente por los eritrocitos
Material (macrohematocrito):
•Tubo de Wintrobe que tiene 11.5 cm de largo x 3 mm de luz (hueco). Para el micro se usa el tubo capilar)
•Pipeta Pasteur larga o pipeta para llenado de hematocrito
•Centrífuga
•Sangre capilar (micro) o venosa (macro) conanticoagulante
•Reactivos
Procedimiento:
1.- Homogeneizar perfectamente la sangre haciendo girar el tubo
2.- Utilizando la pipeta Pasteur se llena de sangre el tubo de Wintrobe exactamente hasta 10, no deben quedar burbujas de aire en el tubo
3.-Centrífuga a 3600 rev x min. Durante 30 min.
4.- Leer en la línea de separación de la columna de glóbulos rojos sabiendo que cada raya tiene 1%
Valores dereferencia:
Hombres = 47 +- 2.5
Mujeres = 42+- 2.5
Cuenta de eritrocitos
Fundamento teórico:
Consiste en diluir la sangre con el líquido de Hayem en una proporción exacta y luego examinar al microscopio una pequeña cantidad de la muestra colocada en la cámara de Neubauer, contando el número de elementos que se encuentran en el retículo de la cámara y mediante una operación matemática se...
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