Biometria Hematica

BIOMETRIA HEMATICA
Introduccion
La sangre está compuesta por una parte liquida (plasma ) y una solida, integrada por eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Dentro de los métodos para analizar la sangre se encuentra la biometría hemática (BH) que es un conjunto de pruebas de laboratorio clínico para el estudio cualitativo y cuantitativo de los elementos que forman la sangre. La BH ayuda aldiagnostico de múltiples enfermedades con base en un estudio comparativo de la cifras de referencia y tomando el sexo, la edad y el ejercicio.

Formula roja
Determinaciones
1.- Hemoglobina (Hb)
2.- Determinación del número de eritrocitos por mm
3.- hematocritos (Hto)
4.- Velocidad de sedimentación eritrocitaria o velocidad de sedimentación globular VSE o VSG
5.- Índices eritrocitarios(índices globulares medios)
a) Volumen globular medio (VGM)
b) Hemoglobina globular media (HbGM)

Equipo
1 espectrómetro
1 microscopio
1 micro centrifuga
1 pipeta de shali (0.02 ml)
1 tubo de ensayo con 0.25 ml de EDTA al 10 %
1 pipeta de Thoma para glóbulos rojos
1 cámara de Neubauer 8 hematocrito o cámara contadora)
1 tubo de wintrobe
1 gradilla de sedimentación globular (Wintrobe)
4 portaobjetos
2 tubos capilares
1 pipeta pasteur con bulbo
1 frasco con solución salina isotónica
1 frasco con reactivo de Drabkin

A ) Hemoglobina

Se determina la formación del complejo cianometahemoglobina, por medio del reactivo de Drabkin.
Técnica:
1.-Marcar los dos tubos de ensayo con la letra b (blanco y con la letra p (problema).
2.- Deposita en cada tubo 5 mlde reactivo de Drabkin
3.- Con una pipeta de Shali con boquilla de aspira sangre arriba de la marca de 20
4.- se limpia el exceso de sangre
5.- se afora a la marca 20
6.- se deposita en el tubo marcado con la letra “p” , aspirando y soplando varias veces sobre el reactivo hasta homogenizar la mezcla.
7.- se deja reposar durante 30 min a temperatura ambiente
8.- La densidad óptica deeste pigmento se mide en el espectrofotómetro a 540 nm en absorbencia, obteniendo un valor que se multiplica por el factor 36.8 ( valor previamente establecido ) y se reporta en gramos/ 100 ml.

Valores de referencia:
Hombres: 15.5 – 20 g / 100 ml Mujeres: 13.5-17g /100 ml

b) Cuenta de eritrocitos
1.- Aspira la sangre con la pipeta de Thoma para globulosa rojos hasta la marca 0.5;limpiar el extremo de la pipeta y llenar con líquido de Gower hasta la marca 101, cuidando que no este no entre con aire.
2.- Agitar durante tres minutos en Angulo recto al eje longitudinal de la pipeta.
3.- Soplando, se elimina de tres a cinco primeras gotas de la pipeta.
4.- Llenar la cámara contadora (Neubauner) mediante un gotea parejo único del liquido debajo del cubreobjetos
5.- Dejartranscurrir cuatro minutos, con el fin de que se sedimenten los eritrocitos.
6.-Se coloco la cámara en la platina del microscopio, se enfoca con el objetivo de 10 X y se observa la cuadricula para asegurarse de que las células están en dilución homogénea.
7.- Cambiar el objetico de 40X , reduciendo adecuadamente la iluminación .
CUADRICULA DE HEMATOCITOMETRO DE NEUBAUNER

D ) Hematocrito1.- Se efectua por medio de la técnica del microhematocrito.
2.- se recoge la sangre por medio de un capilar y se llena hasta las ¾ partes de su longitud total del tubo capilar y se inclina para acelerar su llenado. Se tapa uno de sus extremos con una pequeña porción de plastilina o se flamea con un cerillo para cerrarlo (extremo que no ha estado en contacto con la sangre) y se limpia el excesode sangre.
3.- se coloca adecuadamente en el micro centrifugadora clínica, con la parte cerrada sobre la empaquetadura de caucho (alrededor de la microcentrifuga) , se pone la tapa , se atornilla y se centrifuga a 16 000 rpm durante cinco minutos
4.- se valora el microhematocrito como el porcentaje de toda la sangre venosa ocupada por los eritrocitos y se interpreta de la forma siguiente :...