Biomoleculas

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METODOLOGIA.
Obtención de la muestra.
Para la obtención de la muestra se pesaron 1.0 g de hojas de una planta verde y se maceraron en 30ml de etanol al 80%, el macerado fue incubado enebullición a baño María hasta que el etanol se evaporó por completo, el sobrenadante de la muestra fue re suspendido en 5 ml de agua destilada y se transfirió a cuatro tubos para micro centrifuga y secentrifugó a 14 000 revoluciones durante 5 minutos. Solo se utilizo el sobrenadante para nuestra muestra problema y se puso en un tubo de ensayo ,y las pastillas fueron desechadas.
Separación decarbohitratos por cromatografía.
Para la separación de los carbohidratos para la cromatografía en papel primero se dispuso a preparar la cámara cromatografica esto se realizo colocando una capa de 1 cm de lamezcla de N-propanol-acetato de etilo-agua, se cerró la cámara y se dejo saturar los vapores por dos horas (esto fue realizado con anticipación). Por otro lado en una hoja de papel Whatman se trazouna línea de aproximadamente 2cm dejando libres los bordes laterales de la hoja y se enumeraron puntos que fueron desde el 1 al 6. Después se deposito una gota de solución de carbohidratos en surespectiva marca, se procurando que el diámetro de la gota no fuera mayor de 0.5 cm. El orden como fue sembrado fue 1. Manitol,2. Mio inositol, 3.sorbitol,4.dextrosa,5. La muestra problema, y por ultimo 6.Xilosa. Después se dejo secar perfectamente en el cromatofolio y se introdujo en la cámara con las muestras en la parte inferior, se retiro el cromatograma y se marco el frente con un lápiz, a lasemana se roció el cromatograma con la solución salina de AgNO3 en acetona y se seco al aire y se volvió a rociar con una solución de NaOH al 0.5% en etanol, se volvió a secar el cromatograma al airedurante 10 min y se aclaro introduciéndolo en un recipiente con una solución de NH4OH 2 M, se construyeron la tabla de valores de Rf, para los diferentes azucares y asi se determinaron lso valores...
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