Bioquimica clinica

Práctica No. 2 RODRÍGUEZ RODRÍGUEZ REYNA FABIOLA SOTO AHUMADA MARÍA ANDREA 8 DE FEBRERO DEL 2011 CUANTIFICACIÓN DE LOS NIVELES SÉRICOS DE GLUCOSA OBJETIVOS: a) Determinación de glucosa en ayunas.- que los alumnos aprendan a desarrollar la metodología para la determinación en suero de glucosa por medio de una técnica enzimática-colorimétrica, para la valoración de las alteraciones del metabolismode los carbohidratos. b) Determinación de glucosa pospandrial.- que los alumnos aprendan a desarrollar la metodología para la determinación de glucosa postpandrial, por medio de una técnica enzimática-colorimétrica, para valorar la capacidad del organismo para metabolizar este monosacárido. INTRODUCCION: La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtienefundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el páncreas. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula ensangre, y si esta situación se mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos órganos. Esta es la razón principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que también la provocan. Por tanto, la determinación de glucosa en sangre (glucemia) es útil para el diagnóstico de numerosas enfermedades metabólicas, fundamentalmente de ladiabetes mellitus. También es necesaria esta prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de insulina que se debe administrar para tratarla. Fundamento La glucosa oxidasa convierte la glucosa en peróxido de hidrógeno yácido D-glucónico. La peróxidasa cataliza la oxidación del peróxidode hidrógeno a 4-aminofenazona con la subsecuente unión con el p-hidroxibencensulfonato. Elproducto final es un chidroquinoleína el cual absorbe a 500 nm. La intensidad del color es directamente proporcional a la concentración de la glucosa.

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA CLÍNICA

GLUCOSA POSPRANDIAL: En la persona no diabética, los valores de glucosa posprandial no exceden de 140 mg/dl, por el método de glucosa oxidasa o hexocinasa; los niveles aumentan moderadamente en personas mayoresde 50 años.    Valores normales de glucosa en ayunas 70-110 mg/dl 140-200 mg/dl; tolerancia ala glucosa > 200 mg/dl; es diagnostica de diabetes mellitus

MATERIAL Y METODOS: -Material biológico: 3 ml de sangre periférica en ayuno sin anticoagulante 3 ml de sangre periférica sin anticoagulante 2 horas después de ingerir solución glucosada. -REACTIVOS: Reactivo de color para glucosa Patrón deglucosa concentración 5.56 mmol/L o 100 mg/dl Solución glucosada 100 gr -Material para punción sanguínea.  1 vacutainer  torniquete  2 tubos 13X100 mm con tapón  Gradilla  Torundas -Material para el desarrollo de la práctica.  3 puntillas amarillas  Celdas para espectofotómetros  3 tubos 12X75  1 tubo eppendorf  1 pipeta Pasteur  1 aspirador  Gradilla -Equipo      CentrifugaEspectrofotómetro para lecturas de 500nm Micropipeta para 6µl y 600µl Incubadora a 37°C Cronómetro

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA CLÍNICA

METODOLOGÍA: Diagrama de flujo: Extraer 3 ml de sangre periferica de algun integrante del equipo en ayunas.

Incubar x 10 min a 37° C

Leer absorbancia a 500 nm

CALCULOS:

Cmuestra(mg / dL) 

Absmuestra x100mg / dL Abspatron

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Cmuestra 

0.412 x100mg / dL  99.0mg / dL en ayunas 0.416 0.061 x100mg / dL  15mg / dL Posprandial 0.416

Cmuestra 

RESULTADOS E INTERPRETACIÓN: La concentracion de glucosa en ayunas fue de 99 mg/dl, la cual entra dentro de los valores de referencia, por lo que no presenta Diabetes tomando en cuenta este dato. La concentracion de glucosa posprandial debio salir igual o un...