Bioquimica

Introducción

La bioquímica intenta explicar como funcionan los organismos en términos de los procesos que se llevan a cabo en el interior de sus células. Aunque el bioquimico pueda estar en primerlugar interesado en estudiar los procesos a nivel celular y subcelular, sus hallazgos deben de ser relacionados e interpretados a nivel del órgano, del tejido y del organismo entero, así como de lasrelaciones entre el organismo y su entorno.
Los métodos empleados para la disyunción de las células se basan fundamentalmente en que en general, las células cultivadas son fáciles de romper. Esto seconsigue por choque osmótico, ciclos de congelación - descongelación, o por digestión con encimas (proteasas y lipasas). Otra manera de romper las células animales es el caso de disolventes orgánicoscomo el tolueno. Sin embargo, levaduras y células vegetales poseen una pared celular resistente y dura que requiere que para romperla se combinen métodos enzimáticos y mecánicos. Los métodosenzimáticos implican el tratamiento de las células vegetales con pectinazas y celulazas. En el caso de levaduras su pared se rompe con la lisocima (mezcla de encimas). Entre los métodos físicos tenemos:
•molido con mortero ( en presencia de un agente abrasivo como alúmina)
• agitación en presencia de pequeñas bolas de vidrio (es muy usado en levaduras, pero en las plantas se pueden dañar losorgánulos)
• Un aparato de aspas (Virtis)
• Homogeneizador de embolo (Potter)
Otra manera es la ruptura celular por ultrasonidos. Es muy empleada con bacterias y su pared. Los ultrasonidos soneficaces pero presentan un inconveniente, la muestra se calienta mucho, con lo que debemos actuar de manera esporádica y enfriando la muestra entre aplicación y aplicación.
El primer paso encualquier proceso analítico en el cual el contenido celular deba ser liberado, consiste en la homogeneización de tejidos y la ruptura o lisis celular. Esto nos proporciona una mezcla cruda que se puede...