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PRACTICA DE LABORATORIO N° 8
CONSUMO DE GLUCOSA EN AEROBIOSIS POR Sacharomyces cerevisae
I. INTRODUCCIÓN

II. MATERIALES
2.1. Material Biológico: Sacharomyces cereviceae “levadura delpan o del vino” (suspensión del 10%)
2.2. Material y equipo de laboratorio:
* Sistema de fermentación: matraz de 50 ml de capacidad, tapón de jebe atravesado por tuvo de vidrio, manguerilla ypinza.
* Bomba de vacío
* Gradilla y tubos de 16 y 125 mm.
* Pipetas de 1, de 2, de 5 y de 10 ml.
* Embudos de vidrio y papel filtro.
* Cocina eléctrica y pocillo.
*Espectrofotómetro.
2.3. Reactivos y soluciones:
* Buffer acetato 0, 1 M pH 4.6.
* Glucosa 0.2 M
* Ácido sulfúrico 2/3 N
* Tungtato de sodio 10 %
* Solución cúprico alcalina
*Solución fosfomolibdica.
* Agua destilada.

III. PROCEDIMIENTO
A. SISTEMA DE INCUBACIÓN
1. En un matraz de 50 ml, adicionar:
a) Buffer acetato 0.1 M pH 50 12.0 ml
b)Glucosa 0.05 M en buffer acetato 0.2 M pH 5.0 1.8 ml
c) Suspensión de levadura al 10 % en buffer acetato 1.5 ml
2. Mezclar y tomar una alícuota de 1 ml y colocarla en un tuboque contiene 1 ml de H2SO4 2/3 N. Mezclar y dejar en reposo como mínimo 2 minutos. Esta alícuota corresponde a la muestra del tiempo cero (0 minutos).
3. Tapar el matraz con el tapón de jebe yextraer el aire con una bomba de vacío durante 3 a 5 minutos. Proceder a la incubación, anotando el tiempo de incubación desde el momento en que se toma la primera muestra (tiempo cero).
4. Luego detranscurrido una hora, tomar la segunda muestra y proceder como en el paso 2.
5. A las muestras de los pasos 2 y 4, se les adiciona 1 ml de tungstato de sodio al 10 % .Mezclar vigorosamente, dejaren reposo por 2 minutos, agregar 7 ml de agua destilada, mezclar por inversión y filtrar.

B. DETERMINACIÓN DEL AZÚCAR RESIDUAL
El azúcar residual se determinara en los filtrados del paso 5,...
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