Caracterización de cepas halófilas y halotolerantes con capacidad de producir amilasas, provenientes de la región andina de bolivi

Universidad Mayor de San Simón Facultad de Ciencias y Tecnología Carrera de Biología

Caracterización de cepas halófilas y halotolerantes con capacidad de producir amilasas, provenientes de la región Andina de Bolivia

IV Feria de Ciencias y Tecnología

Autor: Javier Freddy Molina Pimentel Centro de Investigación: Centro de Biotecnología Área: Ciencias de la Vida Fecha: 26 de mayo de 2008Cochabamba - Bolivia

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CARACTERIZACIÓN DE CEPAS HALÓFILAS/HALOTOLERANTES CON CAPACIDAD DE PRODUCIR AMILASAS, PROVENIENTES DE LA REGION ANDINA DE BOLIVIA MOLINA PIMENTEL JAVIER F. Centro de Biotecnología- Universidad Mayor de San Simón (javytusnny@gmail.com) Resumen Diferentes microorganismos halófilos/halotolerantes son reportados como productores de enzimas hidrolíticas, pero sonlimitados aquellos que presentan actividad amilolítica. Cinco cepas bacterianas halófilas y halotolerantes productoras de amilasas que fueron aisladas de la región Andina de Bolivia fueron estudiadas. Se determinó el substrato óptimo para la producción de amilasas a partir de tres diferentes fuentes de almidón (papa, yuca y maíz) y se caracterizó los rangos físico químicos óptimos de crecimiento,morfología, análisis bioquímicos de las cepas en estudio. Se obtuvo una mayor actividad enzimática de las cepas Lv14 (0.788 mmol/min.) y Lc6 (0.603 mmol/min.) ambas a las 48 horas de cultivo. Las cinco cepas mostraron patrones variados de respuesta ante las pruebas bioquímicas. Se determino que las cepas Lc6 y Lv14 son halotolerantes, las cepas LB7, LB14 y V26 son halófilas, todas las cepas sonneutrófilas y mesófilas. Esta potencialidad encontrada nos indica la importancia científica y tecnológica de desarrollar una industria biotecnológica en Bolivia. Palabras claves: halófilo, halotolerante, enzimas hidrolíticas, amilasas. I. Introducción Habitas salinos son aquellos hábitats con elevadas concentraciones de cloruro de sodio u otras sales; así por ejemplo una laguna salina debe poseer unaconcentración superior a la del agua de mar (4% de sales totales) para ser considerada como tal. Estos hábitats están colonizados por una gran diversidad de comunidades microbianas, siendo biotopos apropiados para el crecimiento de microorganismos llamados halófilos [1,2]. Estos microorganismos son capaces de competir satisfactoriamente a la deshidratación y resistencia a la desnaturalización proteínicacausada por la sal [3].

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La diversidad filogenética de los microorganismos capaces de crecer en presencia de sal se encuentran dentro de los tres dominios de la vida: Archaea, Bacteria y Eukarya [4,5]. La diversidad de los microorganismos disminuye al aumentar la concentración de sal. De acuerdo a la definición descrita por [6] los microorganismos halófilos pueden ser clasificados comohalófilos moderados (crecimiento optimo 3% y máximo hasta 15%(w/v) NaCl) y halófilos extremos (crecimiento optimo 15 hasta 25% (w/v) NaCl) [3]. Los microorganismos capaces de crecer óptimamente ausencia de sal, pero son capaces de tolerar hasta un 15 % (w/v) (2.5M) NaCl son llamados halotolerantes [1,4]. Las enzimas son proteínas que se comportan como catalizadores; es decir, aceleran la velocidadcon la que las reacciones se llevan a cabo sin alterar el equilibrio y son responsables de las transformaciones metabólicas en los seres vivos [7]. La actividad de una enzima refleja la capacidad que tiene de transformar un substrato determinado a un producto o productos, en una unidad de tiempo. La actividad enzimática puede ser cuantificada en milimoles de sustrato transformados por minuto, bajolas condiciones óptimas de ensayo. La unidad de actividad enzimática se la expresa en Unidades Internacionales (UI). Las unidades de actividad enzimática pueden también ser expresadas en función del volumen de la solución que las contiene (U/mL) o referida a la cantidad de proteína presente en la solución (U/mg) de proteína. En ambos casos la actividad enzimática recibe el nombre de actividad...