Celulas l.e

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Tecnica para búsqueda de celulas LE
materiales: tubos de macro-hematocrito portas frasquito con 4-8 perlas de vidrio y 1 gota de hepaerina jeringa con aguja gruesa, de 15 cm de largo embudoIntroduccion: El Lupus Eritematoso Sistemico es una enfermedad autoinmune, que afecta a muchos tejidos y organos como articulaciones, piel, sistema nervioso, riñon, corazon, pulmon, sangre, higado, bazo yojos. Las celulas LE son polimorfonucleares que fagocitaron restos nucleares alterado, proveniente de la destruccion del nucleo de otros leucocitos, por el llamado Factor LE (factor nuclear). Este es IgGanti ADN que se fija a la superficie del nucleo y determina alteraciones en la cromatina; y entonces al ser recubierto por anticuerpos, es fagocitado por los neutrofilos. El objetivo es hallarneutrofilos que tengan adherido an su superficie restos nucleares, o bien que los restos esten en su interior. Existen 2 metodos (entre otros) A) Metodo sin coágulo: 1- Sacar sangre al paciente, y colocaren frasquito con las perlas que posean 1 gota de heparina. 2- Dejarlo rotar en el agitador por 30 minutos, o bien agitar vigorosamente por 5 a 10 minutos para generar la lisis de leucocitos. 3- Llevarla muestra a estufa de 37 ºC entre 1 a 4 horas, para darle tiempo a los leucocitos enteros a fagocitar los restos de los lisados y que decanten los globulos del plasma. 4- Con la jeringa de agujalarga aspirar la capa de leucocitos, en la interface plasma-globulos rojos y descargar dentro de 2 a 4 tubos de macrohematocrito. 5- Centrifugar a muy baja velocidad (500-1000 rpm), por 5 minutos. 6-Aspirar nuevamente con la jeringa la capa de leucocitosde los tubos, y descargar en los portas, y realizar los extendido con extensor. 7- Colorear por el metodo de May Grunwald - Giemsa y ver con objetivo de inmersion. B) Método con coágulo: 1- Se sacan unos 5 a 10 ml de sangre y se la deja coagular durante 2 horas a 37 ºC. 2- Centrifufar a 3500 rpm por 10 minutos. 3- Eliminar el suero y...
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