CINETICA SEGUIDA POR ESPECTROFOTOMETRIA

Cinética es un término que se utiliza para expresar la velocidad de una reacción química. Supongamos la reacción enzimática donde el sustrato S se convierteen el producto P:

S P

La velocidad de reacción queda definida como la desaparición de S en el tiempo ó la aparición de P en el tiempo, de acuerdo a la expresión diferencial:
V= - dS ó V = dP
dt dt

El signo negativo en la primera ecuación significa que S desaparece, en cambio P aparece y por eso tiene signo positivoExperimentalmente la desaparición de S o aparición de P se debe medir como la variación del número de moles por unidad de tiempo. Es así que se define la actividad enzimática (velocidad de reacción) enUnidades de actividad enzimática lo que está definido como:

1 U = 1 mol
min

Es decir, una unidad de actividad enzimática es igual a una velocidad de aparición de 1 mol de P porcada minuto. Tendremos así que la actividad (o velocidad) podrá ser 10 U, 1000 U o bien 0,1 U, lo que reflejará cuán rápida es la reacción que dependerá de la cantidad de enzima en el sistema.

Dadoque las metodologías para medir la concentración de un químico (absorción molecular, fluorescencia, absorción atómica, etc) no miden directamente número de moles sino una característica del analito, enla mayoría de los casos en el laboratorio clínico lo que se usa es la absorción molecular, es decir, se mide la absorbancia del analito a la longitud de onda correspondiente y después se determina laconcentración por la ley de Beer aplicando la conversión a través del .

En este contexto, experimentalmente la cinética se registra como variación de absorbancia en el tiempo, cuyo gráfico es elque se muestra:



Este gráfico recibe el nombre de curva de progreso y registra el aumento de producto en el tiempo a través de su absorbancia. Nótese que el gráfico tiene una parte recta... [continua]

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