Coliformes

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ESCUELA POLITECNICA NACIONAL

ESCUELA DE FORMACION DE TECNOLOGOS

CARRERA EN TECNOLOGIA DEL AGUA Y MEDIO AMBIENTE

SEMESTRE: MARZO 2010-JULIO 2010

NOMBRE: PAUL PUENTE

MATERIA: CARACTERIZACIÓN DEL AGUA

TEMA: LABORATORIO Nº 2
COLIFORMES TOTALES

NIVEL: 3Ro

OBJETIVOS

El Objetivo de realizar esta practica es conocer el grado de contaminación por coliformes totales en lamuestra proporcionada por el instructor utilizando el método del NMP (numero mas probable)

RESUMEN

Los coliformes totales son las Enterobacteriaceae lactosa-positivas y constituyen un grupo de bacterias que se definen más por las pruebas usadas para su aislamiento que por criterios taxonómicos. Pertenecen a la familia Enterobacteriaceae y se caracterizan por su capacidad para fermentar la lactosacon producción de ácido y gas, más o menos rápidamente, en un periodo de 48 horas y con una temperatura de incubación comprendida entre 30-37ºC.

INTRODUCCIÓN

Los coliformes totales son bacilos gramnegativos, aerobios y anaerobios facultativos, no esporulados. Del grupo forman parte varios géneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter, etc. Se encuentran en el intestino delhombre y de los animales, pero también en otros ambientes: agua, suelo, plantas, cáscara de huevo, etc.
Una elevada proporción de los coliformes que existen el los sistemas de distribución no se debe a un fallo en el tratamiento en la planta, sino a un recrecimiento de las bacterias en las conducciones. Dado que es difícil distinguir entre recrecimiento de coliformes y nuevas contaminaciones, seadmite que todas las apariciones de coliformes son nuevas contaminaciones, mientras no se demuestre lo contrario.

Dentro del grupo de los coliformes totales existe un subgrupo que es el de los Coliformes fecales. Los coliformes fecales son coliformes totales que además fermentan la lactosa con producción de ácido y gas en 24-48 horas a temperaturas comprendidas entre 44 y 45ºC en presencia desales biliares. Los coliformes fecales comprenden principalmente Escherichia coli y algunas cepas de Enterobacter y Klebsiella.

Su origen es principalmente fecal y por esos se consideran índices de contaminación fecal. Pero el verdadero índice de contaminación fecal es Escherichia coli tipo I ya que su origen fecal es seguro. Desde el punto de vista metodológico Escherichia coli es el Coliformefecal que además es positivo a la prueba del Indol.

1. DETERMINACIÓN COLIFORMES TOTALES
Límite de reporte > 2NMP/100ml

1. MATERIALES Y EQUIPOS

1. Tubos de Ensayo
2. Tubos Durham
3. Gradillas
4. Balones aforados de 1000 ml.
5. Reactivo Caldo Bilis

2. PROCEDIMIENTO

1. Preparación Caldo Brillante

1. Volumen requerido

El volumen requerido seencuentra en función del número de muestras y diluciones requeridas. En forma general se puede tomar en cuenta las siguientes referencias:
1. Agua no contaminada con coliformes (ejm. Agua potable) 3 diluciones o series.
2. Agua medianamente contaminada (ejm. Agua del cmal): 8 diluciones o series.
3. Agua altamente contaminada (ejm.Agua procedente de fosas sépticas) 16 diluciones o series.
✓ Para cada serie o dilución se debe preparar 3 tubos
✓ Cada tubo debe contener 5 ml caldo brillante

Por lo tanto:

Volumen de caldo = (#diluciones/muestra) x (3 tubos/dilución) x (5ml/tubo) x (#muestras) (ml)

CONCENTRACIÓN DE Caldo = 40 mg reactivo caldo brillante/1solución

Ejm. Agua Potable,análisis de 30 muestras:

Volumen de caldo requerido = (3 diluciones/muestra) (3 tubos/dilución) (5ml/tubo) (30 muestras)= 1350 ml caldo.

2. Procedimiento

✓ Pesar la cantidad de caldo Brillante requerida
✓ Adicionar agua destilada según el volumen de caldo requerido
✓ Agitar en el agitador de ultrasonido
✓ Aforar al volumen de caldo requerido.

2. Preparación de...
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