Cromatografia capa fina

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Información previa. Departamento al que corresponde la práctica: Química Orgánica. Titulo de la práctica: Cromatografía en capa fina Numero de la práctica: 8 Fecha de realización: 22 / 04 / 03 Objetivos de la práctica. • Aprendizaje de la técnica de cromatografía en capa fina • Conocimiento de conceptos cromatográficos: polaridad, fase móvil, fase estacionaria, factor de retención, etc. •Determinación de los componentes orgánicos presentes en una muestra usando sustancias patrón. Antecedentes. La cromatografia es una técnica de análisis químico utilizada para separar sustancias puras de mezclas complejas. Esta técnica depende del principio de adsorción selectiva (no confundir con absorción). La cromatografía fue descubierta por el botánico ruso, de origen italiano, Mikhail Tswett en1906, pero su uso no se generalizó hasta la década de 1930. Tswett separó los pigmentos de las plantas (clorofila) vertiendo extracto de hojas verdes en éter de petróleo sobre una columna de carbonato de calcio en polvo en el interior de una probeta. A medida que la solución va filtrándose por la columna, cada componente de la mezcla precipita a diferente velocidad, quedando la columna marcada porbandas horizontales de colores, denominadas cromatogramas. Cada banda corresponde a un pigmento diferente. La cromatografía es probablemente la más versátil de las técnicas de separación: es aplicable a cualquier mezcla soluble o volátil. De hecho las técnicas de separación suelen dividirse en dos grandes grupos: cromatográficas y no cromatográficas. La elección de una técnica cromatográficaconcreta dependerá de la naturaleza y cantidad de la muestra, del objetivo de la separación y de las limitaciones del tiempo y equipo asequible. Podemos distinguir 3 tipos de cromatografía dependiendo si la fase estacionaria/fase móvil es sólido/líquido, líquido/líquido o líquido/gas: • Si es sólido/líquido, cabe distinguir entre: Cromatografía de adsorción: El sólido adsorbe al componente queinicialmente estaba en fase móvil (liquida o gaseosa) (Fuerzas de Van der Waals). Cromatografia de cambio iónico: el sólido es un cambiador de iones (fuerzas electrostáticas). Cromatografia de exclusión (o de geles): el sólido es un gel formado por polímeros no iónicos porosos que retienen a las moléculas de soluto según su tamaño. Cromatografia de afinidad: es un tipo especial de cromatografia deadsorción, utilizada especialmente en bioquímica, en la que un sólido tiene enlazado un llamado ligando de afinidad que puede ser por ejemplo, un indicador enzimático o un anticuerpo. 1

• Si es líquido/líquido, cabe distinguir: Cromatografía de partición: el soluto se reparte entra la fase móvil (liquido o gas) y la fase estacionaria. • Si es líquido/gas, cabe distinguir entre: Cromatografíagas−liquido (CGL), que es una cromatografía de partición. Cromatografía gas−sólido (CGS), que es una cromatografía de adsorción. Si es un fluido supercrítico, (fluido calentado a una temperatura superior a la temperatura critica, pero simultáneamente comprimido a una presión mayor que su presión critica), se trata de la cromatografía de fluidos supercríticos (CFS), que puede ser de partición o deadsorción. Las técnicas cromatográficas, según el dispositivo utilizado para conseguir la separación entre la fase móvil y la estacionaria, pueden ser: en columna y plana. Cromatografía en columna: Se utiliza un tubo cilíndrico, en cuyo interior se coloca la fase estacionaria y a su través se hace pasar la fase móvil. El flujo de la fase móvil (liquido o gas) a través de la estacionaria se consigue:1)por presión, 2)por capilaridad, 3) por gravedad. Cromatografia plana: La fase estacionaria esta colocada en una superficie plana que en realidad es tridimensional, aunque una de sus dimensiones es muy reducida, por lo que puede considerarse bidimensional. Se divide en dos tipos generales: 1. −Cromatografía en papel: en la que el papel absorbente actúa como soporte de la fase estacionaria...
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