cultivo in vitro de huizache (Acasia farnesiana)

Cultivo In Vitro de huizache
Preparación de medio MS sacarosa.
Reactivos para preparar 1 L.
4.4 g. medio Murashige & Skoog Basal medio con vitaminas phytoTechnology laboratorios®.
30 g. sacarosacomercial
4.4 g. Gellan Gum Powder (phytogel) cultureGel® type I – BioTech Grade
1 L de agua destilada
Material e Instrumentos
Balanza analítica marca: OHAUS® modelo: Explorer® EP214C
Matrazcon capacidad de 1 L
Potenciómetro marca: Denver Instrument modelo: 250
Parrilla eléctrica marca: CORNING® modelo: PC-420D
Frascos de cristal transparentes sin color (tipo gerber)
Papel aluminio ypapel film
Modo de preparación.
1. Pesar en la balanza analítica 4.4 g. de medio sacarosa y agregar a un matraz con 1 L de agua destilada
2. Agregar 30 g. de sacarosa
3. Ajustar pH a 6.7 conpotenciómetro
4. Agregar 4.4 g. de phytogel
5. Calentar hasta ebullición en la parrilla
6. Vaciar 25 ml a frascos de cristal y sellar con aluminio y papel film
Escarificación y asepsia.
ReactivosÁcido sulfúrico concentrado
Solución de cal en agua 1:3
Solución con detergente comercial 10 g por cada 100 ml
Nitrato de plata (plata coloidal, microdyn®) 10 gotas por litro de agua
Soluciónfungicida Lucaptan (captan) marca: Lucava® 1g por litro de agua
Material
Campana de extracción marca: Labtech® modelo: LFH-120SCI
3 vasos de precipitado
Parrilla eléctrica marca: CORNING® modelo: PC-420DAgitador o capsula magnética

1. Colocar las semillas en un vaso de precipitado con ácido sulfúrico concentrado hasta que cubra las semillas por completo durante 45 min
2. Pasar semillas al vasocon solución de cal durante 5 min
3. Enjuagar durante 10 min al chorro de agua
4. Colocar semillas en solución con detergente 30 min y en agitación
5. Pasar a solución de nitrato de plata (platacoloidal o microdyn) 1 gota en 100 ml de agua durante 15 min
6. Colocar en un vaso de precipitado una sanita humedecida con solución fungicida, colocar las semillas sobre la sanita y dejar tapado...