Determinación de la concentración de proteínas en el extracto crudo de hígado (biuret)

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  • Publicado : 2 de febrero de 2011
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Laboratorio 1: Determinación de la concentración de proteínas en el extracto crudo de hígado (Biuret)

Fundamento:
Las proteínas son compuestos de carbono, oxígeno y nitrógeno. La mayoría deellas contiene además azufre, y algunos fósforos. Sus moléculas son de proporciones coloidales, todas son muy complejas molecularmente y tienen alto peso molecular. La molécula proteica está compuesta deuna combinación de aminoácidos por condensación. La molécula proteica está compuesta de una combinación de aminoácidos por condensación. Las pro teosas, peptonas, péptidos y aminoácidos son derivadosde las proteínas formadas en síntesis e hidrólisis.
Hay ciertas reacciones coloreadas que dan las prot3einas y dependen de los aminoácidos presentes en la molécula proteica. Todas dan la reacción deBiuret. Esta es debido al grupo NH-CO.
El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias decomposición desconocida.
Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O6•4H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presenciade proteínas, y vira a rosa cuando se combina con poli péptidos de cadena corta. El Hidróxido de Potasio no participa en la reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante espectroscopia ultravioleta-visible a una longitud deonda de 540 nm.

Materiales y métodos:
• Homogenizador.
• Espectrofotómetro.
• Vortex
• Baño maría
• Pipetas
• Tubos de ensayo
• Gradillas

Revisión bibliográfica:
El glucógenofosforilasa, por ejemplo, cataliza la fosforólisis del glucógeno, produciendo glucosa 1-fosfato. La desfosforilación, eliminación de un grupo fosforilo de un éster fosfato en la que el agua es la especie...
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