Determinacion de bilirrubinas

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DETERMINACION DE BILIRRUBINAS (TOTAL, DIRECTA E INDIRECTA) EN SUERO

Resumen y Principio
La mayoría de los procedimientos clínicos de rutina para la determinación de bilirrubina sérica, estánbasados en la clásica reacción Diazo de Ehrlich1, la cual se aplicó primero a la estimación de estos pigmentos biliares en suero en 1913 por Van den
Berg y Snapper.2 Winkelman y colaboradores3proporcionaron una revisión excelente de muchas metodologías de bilirrubina.
Cuando una solución de ácido sulfanílico en ácido clorhídrico diluido es combinada con nitrito de sodio, se forma ácido nitroso.Este ácido inestable, el cual debe ser preparado en el momento del ensayo, reacciona para formar ácido sulfanílico diazotizado.
Este último (también llamado “p-bencendiazonio sulfonato”) se acopla conla bilirrubina para producir azobilirrubina, la intensidad de color de este es proporcional a la concentración de bilirrubina.
Ya que los estándares de bilirrubina sufren una gran degradación por suinestabilidad, el método presentado utiliza una solución acuosa de N-1-naftiletilendiamina
dihidroclorhídrico como calibrador, de acuerdo con Bilissis y Speer4. Esta amina aromática estable pura seacopla con el ácido sulfanílico diazotizado bajo las condiciones de prueba para dar un colorante azo con cualidades espectrales similares a la azobilirrubina. El calibrador proporcionado ha sidopreparado para obtener, por la técnica descrita, un color equivalente al nivel de bilirrubina a 540 nm.

INTRODUCCION
La bilirrubina es un pigmento biliar de color amarillo rojizo que resulta delmetabolismo de la hemoglobina. Dicho metabolismo inicia con la descomposición de los glóbulos rojos y luego es transportada por la albúmina en la sangre hasta el hígado.
Los exámenes de bilirrubina total(directa más indirecta), sirven para determinar si una persona padece alguna enfermedad hepática (elevación de la bilirrubina no conjugada) o un problema de la vesícula biliar (elevación de la...
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