Determinacion De Fucoidano
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1 Objetivos y alcance
1.1 Este protocolo establece elmétodo para determinar el contenido de fucoidano crudo en matrices de algas pardas.
2 Actividades
2.1 Aparatos y Reactivos
Aparatos
a) Balanza analítica, capaz de medir a 0.1 mg.b) Centrifuga 5000 ppm
c) Estufa secado.
Reactivos
a) Etanol p.a.
b) HCl 0.01 M
c) NaOH 0.1 N
2.2. Procedimiento
2.2.1 Pesar 10 g de harina de algas, hidratar ehidrolizar con 200 ml de HCl 0.01M durante 3 horas a ebullición.
2.2.2 Dejar enfriar y centrifugar a 5.000 rpm por 10 min. Para eliminar el queque de algas.
2.2.3 Se recupera el sobrenadante en unvaso precipitado. Se cuantifica el volumen.
2.2.4 Se neutraliza hasta ph 7 con NaOH 0.1 N. Se cuantifica el volumen
2.2.5 Se añade etanol hasta un 30% v/v y se centrifuga a 5000 rpm por 10min. Para eliminar el precipitado
2.2.6 Se recupera el sobrenadante en un vaso precipitado. Cuantificar volumen.
2.2.7 Se añade etanol hasta un 60% v/v y se centrifuga a 5.000 rpm por 10 min.2.2.8 Se recupera el precipitado y se deja secar a 108°C por 6 hrs.
2.2.9 Se determina el peso seco y se expresa como g de fucoidano crudo por 100g de harina de algas (%)
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