DETERMINACION DE PROTEINAS POR EL METODO DE BRADFORD Y LOWRY.

INTRODUCCION.
Método de Lowry:
Es un método colorimétrico de valoración cuantitativa de lasproteínas. A la muestra se añade un reactivo que forma un complejo coloreado con las proteínas, siendo la intensidad de color proporcional a la concentración de proteínas,según la ley de Lambert-Beer

Este método consta de dos etapas:

1) Los iones Cu2+, en medio alcalino, se unen a las proteínas formando complejos con los átomosde nitrógeno de los enlaces peptídicos. Estos complejos Cu2+-proteína tienen un color azul claro. Además, provocan el desdoblamiento de la estructura tridimensional dela proteína, exponiéndose los residuos fenólicos de tirosina que van a participar en la segunda etapa de la reacción. El Cu2+ se mantiene en solución alcalina enforma de su complejo con tartrato.

2) La reducción, también en medio básico, del reactivo de Folin-Ciocalteau, por los grupos fenólicos de los residuos de tirosina,presentes en la mayoría de las proteínas, actuando el cobre como catalizador. El principal constituyente del reactivo de Folin-Ciocalteau es el ácidofosfomolibdotúngstico, de color amarillo, que al ser reducido por los grupos fenolicos da lugar a un complejo de color azul intenso.

Método de Bradford:
Está basado en el cambio decolor del colorante Coomassie brilliant blue G-250 en respuesta a diferentes concentraciones de proteínas. Este compuesto interacciona con aminoácidos básicos(especialmente arginina) y aromáticos. Esta unión del colorante con las proteínas provoca un cambio en el máximo de absorción del colorante desde 465 a 595 nm. Por lo tanto, [continua]

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(2011, 03). Determinacion de proteinas por el metodo de lowry y bradford. BuenasTareas.com. Recuperado 03, 2011, de http://www.buenastareas.com/ensayos/Determinacion-De-Proteinas-Por-El-Metodo/1694228.html

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