Distinguir las bacterias ácido-alcohol

ALUMNO:
Carlos Martin Camacho Moreno

TRABAJO:
Tinción Ziehl Neelsen

MATERIA:
Bacteriologìa

Profesora:
Isabel Tapia Sasturain

ESCUELA:
Centro tecnológico industrial y de servicios17-11-2013
FUNDAMENTO:
Distinguir las bacterias ácido-alcohol resistente de las no resistentes mediante dos tinciones:
Las paredes celulares de los bacilos ácido-alcoholresistentes contienen ácidos grasos de cadena larga (de 50 a 90 átomos de carbono) en su pared celular, las cuales le dan las propiedades para resistir la decoloración con alcohol-ácido.
Estasmicobacterias (bacilos aerobios no formadores de esporas) absorben el colorante (fuscina) muy lentamente debido a las grasas y lípidos de su pared celular, por lo tanto para acelerar esto, se calienta lasolución de fuscina aplicada sobre el preparado hasta la formación de vapores, cuando este se enfría se hace una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede saliraplicándole ácido-alcohol, por eso se denominan ácido-alcohol resistentes.

MATERIALES:
-Mechero
-Porta objetos
-Asa bacteriológica
-Pipetas
-Pinzas de madera
-Microscopio


REACTIVOS:
-Fuscina-alcohol-ácido 3,0 %
-Azul de metileno
-Microorganismos
-Aceite de inmersión
PROCEDIMIENTO:
1.- fijar con calor la muestra al portaobjetos.
2.- cubrir el frotis con el reactivo fuscina yflamearlo en un mechero durante un minuto hasta la aparición de vapores.
3.- dejar reposar el colorante sobre el portaobjetos durante 4 a 5 minutos sin calentar.
4.- lavar el frotis con agua destilada einclinar para eliminar el exceso de agua.
5.- decolorar con el ácido-alcohol durante 2 minutos. Lavar el frotis con agua destilada e inclinar para escurrir el exceso de agua.
6.- cubrir el frotis conazul de metileno y dejar reposar durante un minuto.
7.- lavar con agua destilada y dejar secar al aire
8.- examinar en el microscopio con aceite de inmersión buscando bacilos ácido-alcohol...