Espectros confocal

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Normalmente, tienes que seleccionar aquellos rangos que quieras ver: recuerda, en el confocal del ICAM teníamos tres: Utilizamos el software Leica TCS SP2versión 31102002. Transmisión: 380-770 nm. Verde (GFP): 505-530 nm. Rojo (Yoduro de propidio): 600-730 nm. El de transmisión era el GRIS (poner pestañita activa, esdecir, marcada; ver flecha fucsia). El de GFP era el verde (PMT1) y el rojo (u otro que quieras o te interese, como por ejemplo, YFP), era el PMT2.

Parafijar el rango haz doble click en la barra de cada PMT, el 1 y 2, sólo; para el gris no hacía falta (aunque debe estar activo para verlo). Y en range propertiespones el intervalo que te interese: Verde (GFP): 505-530 nm. Rojo (Yoduro de propidio): 600-730 nm. Ver imagen siguiente:

Otra cosa importante era el láser:aquí utilizamos Argón/Kriptón (excitación: 488 nm.).

Lo digo porque dependiendo del láser así fijaremos el filtro de excitación/absorción: En el ICAM,utilizamos el RSP 500, básicamente porque no hay uno que filtre un espectro de excitación de 488 nm. Pero bueno, mientras el filtro (500 nm.) este por encima del picode excitación (488 nm.) ¡vamos bien¡

Por último, la cantidad de láser utilizada, recuerda que lo poníamos de 60-80% para observar mejor la GFP y no ver elpunteado verde en la composición por toda la foto. No sé si tendreis la ruedecilla del láser, recuerda lo poníamos como a las 11h.

En la presentación del otrodía del Skype te mande una diapositiva donde pone un esquema explicativo del funcionamiento de excitación/absorción y emisión que ayuda a recordar un poco.

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