Esporas

COLORACION DE ESPORAS

Las esporas son cuerpos producidos dentro de la célula de algunas especies de Enterobacterias , ellas son más resistentes a las condiciones adversas que las célulasvegetativas de origen . se presentan casi exclusivamente de forma bacilar,y están compuestas por sales de ácido dipicolínico.
La esporulación no es mecanismo de multiplicación de la población bacterianasino más bien es de preservación o protección de la especie, en circunstancias adversas a la sobrevivencia de la célula vegetativa. La formación de esporas tiene lugar bajo condiciones favorables decrecimiento, inmediatamente después del período de multiplicación logarítimica.
Las bacterias más esporoformadoras pertenecen al género Bacillus y Clostridium , pero algunas del orden Actinomycetalespueden producir espora, pero no son altamente resistentes.
Las esporas no se tiñen fácilmente. En procedimientos de rutina tales como la coloración de Gram, pueden aparecer cuerpos refráctiles sinteñir. Usualmente se requiere la aplicación de calor, con un procedimiento especial, para promover la penetración del colorante dentro de las esporas. Las esporas también pueden observarse porexamen microscópico de campo oscuro, también pueden teñirse en frio con colorantes más concentrados.

MATERIAL

• Cultivo de Bacillus cereus de 48horas en agar nutritivo
• Colorante de verde demalaquita y safranina, según la técnica de Wirtz-Conklin

PROCEDIMIENTO
METODO DE WIRTZ-CONKLIN

1. Preparar un frotis de B. cereus o B. subtilis y fijarlo a la llama
2. Cubrir toda la lámina converde de malaquita y calentar hasta que haya emisión de vapores, manteniendo así durante 5-10 minutos. Evitar l ebullición y agregar colorante si se deshidrata la lámina
3. Lavar la lámina con agua delchorro durante medio minuto y luego cubrirla con safranina por 30 segundos
4. Lavar la lámina con agua del chorro, escurrirla, dejarla secar y observar con objetivo de inmersión
5. Anote...