Extracción y cuantificación de la rutina en sambucus nigra l., sauco mediante cromatografia en capa preparativa

EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE LA RUTINA EN Sambucus nigra L., SAUCO MEDIANTE CROMATOGRAFIA EN CAPA PREPARATIVA

LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUIMICA

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA
DEPARTAMENTO DE FARMACIA
MEDELLÍN
2010
DATOS

Nombre científico: Sambucus nigra L.
Familia: Caprifoliaceae.
Nombre común: Sauco
Droga: Flores y frutos

1.1.Determinación de la curva de calibración para la rutina con una muestra estándar.

Primero se realizo un espectro de UV/Vis de una estándar de rutina que comprendía de 200 a 500 nm, y de este sacar los máximos de absorción para la posterior cuantificación de este analito en la muestra de flores de sauco.

En esta práctica se desea determinar en grado analítico la concentración de la rutina presenteen el Sambucus nigra L, sauco, para esto se realizó una curva de calibración con la ayuda de un estándar del metabolito de interés (rutina). En La tabla 1 se puede observar los valores de absorbancia con respecto a la concentración de la rutina en dos lecturas diferentes (Absorbancia 1 y Absorbancia 2) a longitudes de onda de 257nm y 359nm. Las curvas de calibración (figura 1,2) fueronconstruidas con los dos ensayos, para mirar el mejor rendimiento y mejor relación entre las variables.

Tabla 1. Datos para curva de calibración de distintas diluciones a 257nm y 359nm en espectrómetro UV-Visible

|Concentracion (ppm) |Absorbancia (λ=257 |Absorbancia (λ=359 |
| |nm) |nm) |
| 25 |0,849 |0,705|
|20 |0,755 |0,619 |
|15 |0,545 |0,452 |
|10 |0,580 |0,475 |
|5 |0,261 |0,216 |
|R2 |0,8932 |0,9021 |

[pic]

Figura 1. Estracto concentrado a25ppm longitudes y absorbancias escojidas para comenzar a hacer la curva

[pic]
Figura 2. Espectro ultra violeta para el patrón de rutina1

[pic]

Grafica 1. Espectro de Absrobancia del extracto a λ=257nm

[pic]

Grafica 2. Espectro de Absrobancia del extracto a λ=257nm

1.2. Determinación analítica de la concentración de rutina en Sambucus nigra L, sauco

[pic]

Figura 3.Cromatografía en capa preparativa del extracto deSambucus nigra L, sauco con fase móvil Acetato de etilo/ Ac. Formico/ Ac Acetico/ Agua 100:11:11:27 y luz UV como revelador

A continuación se presentan los datos obtenidos en peso, absorbancia y concentración para la determinación analítica de Rutina.

Peso muestra: 1.0210 g
Peso frasco rota evaporador: 64.7403 g
Peso frasco rota evaporador +extracto: 65.5068 g
Peso frasco rota evaporador extracto después de sembrado: 64.9519 g
Distancia recorrida por el eluente en la placa: 8.3 cm
Distancia recorrida por el analito (rutina) en la placa: 6.2 cm
Peso del raspado de la placa: 59.58 mg

Absorbancia de la rutina extraida:

λ= 257 nm = 0.601
λ= 359 nm= 0.286

CÁLCULOS

Peso de extracto total obtenido: 65.5068 – 64.7403 =0,7665 gramos
Peso de extracto después de sembrado: 65.5068 – 64.9519 = 0,5549 gramos
Peso extracto sembrado: 0.5549 gramos

Concentración de la rutina hallada por medio de la ecuación de la regresión lineal:

λ = 257 nm

C = 0.601 -0.1927 = 15.12 ppm
0.027

λ =359 nm

C= 0.286-0.1927 = 4,16 ppm
0.0224

RF = 6.2 cm = 0,75
8.3 cm

Tabla2. Cálculos del porcentaje de Rutina en la droga de Sambucus nigra L.

| |Cálculo |Resultado |
|Rutina en la muestra |15.12 mg/L x (25ml/1ml) x (10ml) x (1L/1000ml) = |3.78 mg |
|Porcentaje de rutina en |3.78 mg x 100 =...