Extracción de dna

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  • Publicado : 25 de mayo de 2011
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Extracción de DNA
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula.A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite enalcohol
Objetivos
1. Realizar la extracción de ADN de tejidos animales y vegetales y reflexionar sobre la simpleza de su composición
2. A partir de la longitud enorme de las fibras inferir que el ADNse encuentra replegado en el núcleo
Materiales
• 1 plátano, manzana, tomate, palta, hígado de pollo, huevo u otro alimento de origen animal o vegetal
• 100 ml de agua destilada • 1 vaso pp de250 ml
• 9 g de sal • 2 ml de detergente líquido al 20%
• 1 ml de alcohol al 95% frío • Solución ablandadora de carne o enzima
• 1 tubo de ensayos • 1 juguera o un mortero
•Papel filtro • 1 Mechero con trípode y rejilla
• Hielo
Protocolo
En una juguera, mezcla el alimento que vayas a utilizar con 100 ml de agua destilada. Muele sólo por 15-20 segundos, hasta que seproduzca una mezcla homogénea. No muelas más ya que puedes romper el ADN. Si no tienes juguera muele en un mortero agua.
En un vaso pp, prepara una solución de detergente o shampoo al 20% y agrega9 g de sal de mesa. Mézclalos suavemente para no producir espuma. Puedes usar champú o lavalozas de diferentes marcas para comparar la eficiencia de la extracción al final del experimento.
Agrega ala solución preparada en el paso 2, tres cucharas soperas bien llenas de la mezcla de cebolla (u otra fruta) del paso1. Mezcla la solución con la cuchara por 5 a 10 minutos sin producir espumaColoca la mezcla anterior en un baño María con agua a 65º C durante 10 min. (No debe hervir ni pasar los 65 ºC). Retira del baño maría y enfríala rápidamente, colócala en una mezcla de hielo y sal...
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