Extraccion de adn

EXTRACCIÓN DE ADN DE LA MUCOSA BUCAL DE HUMANO Y SU TINCION CON COLORANTES NATURALES Y SINTÉTICOS.
Ma. De Lourdes Delgado Aceves.
lulu_ss108@hotmail.com
lunes 07 de noviembre 2011

INTRODUCCIÓN
El ADN fue aislado por primera vez en 1869 por el médico alemán Friedrich Miescher, la sustancia obtenido se encontró solamente en el núcleo razón por la que originalmente llamada nucleínaposteriormente este término ha sido modificado hasta llegar a denominación actual de acido desoxirribonucleico (ADN) (Fonseca, 2010). El ADN se encuentra en el interior del núcleo de todas las células, disperso y muy replegado, unido a proteínas para formar la cromatina, por lo tanto, podremos extraerlo a partir de prácticamente cualquier material de origen biológico, para ello es necesario romper lascélulas para separar el núcleo y romper éste para liberar el ADN, separarlo de las proteínas y precipitarlo para separarlo de la solución acuosa. (Martínez, s.f.)
El DNA puede ser extraído a partir de homogenizados de tejidos, de células sanguíneas o de restos celulares descamados como células de la mucosa bucal o folículos pilosos, la extracción se realiza por procesos muy similares con ligerasvariantes para cada proceso (Jiménez, 2003), ó de otros tipos de materiales biológicos (hueso, diente, líquido amniótico, etc.) y el éxito del análisis molecular dependerá de su adecuado aislamiento en términos de cantidad calidad y pureza; es necesario separar el ADN del resto de los componentes celulares así como de la materia no biológica que puede estar presente (Fonseca, 2010).
La extracciónde ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula en su principio se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN, el tampón contiene ADN y todo un surtidode restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción, y las proteínas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separadas de él por acción del detergente, por tanto, queda extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza alcohol, (Cortés, 2001).El ADN es insoluble en el alcohol, por lo queal soltarse de las células precipita y es más fácil extraerlo (Jiménez, 2003).
Es así como Idealmente los procesos de aislamiento deben ser rápidos y fáciles de realizar, garantizando la obtención del material genético aun con pequeñas cantidades de fluidos o tejidos (Fonseca, 2010).
Por otro lado para su tinción del DNA existe colorantes naturales como el carmín de cochinilla producido por elinsecto Dactylopius coccus que es un parasito de las pencas de nopal, se obtiene de las hembras desecadas del insecto el colorante es el rojo pero puede variar desde el cereza y el violeta utilizando diferentes técnicas y mordentes, este tipo de colorante no tiene el poder de entintar por sí solo, necesita de un tratamiento de sales metálicas solubles (Pine, s.f.). También hay colorantesartificiales como el que LaCour, en 1941, encontró un nuevo uso para la orceína, la técnica de la aceto-orceína para fijar y colorear los cromosomas y estudiar el cariotipo: número, forma, defectos y deformidades de los cromosomas, Pues el colorante de la aceto-orceína colora el ADN empaquetado, la acción es casi igual a otros colorantes de DNA, se intercala entre las bases nitrogenadasreconociéndolas en sus subgrupos y así se da la coloración, es una sustancia que se extrae de un liquen, y se sintetiza a partir de orcinol, se usa para ver los cromosomas, como actúa es algo que no está en la literatura (si tiñe al DNA o a las proteínas asociadas a esta), tampoco su exacta composición química, pero lo que sí se sabe es que en esta coloración el tipo de unión predominante entre el cromosoma...