Filosofia

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  • Publicado : 24 de marzo de 2011
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TSI Agar

Medio universalmente empleado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa, lactosa, sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico.

FundamentoEn el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fermentables.El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico yproducen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que sedetectan por medio del indicador rojo de fenol,el cual vira al color amarillo en medio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrógeno el que reacciona luego con una sal de hierroproporcionando el típico sulfuro de hierro de color negro.
Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
Extracto de carne | 3.0 | Suspender 62,5 g del polvo por litro de agua destilada. Mezclar bien ycalentar con agitación frecuente, hervir 1 o 2 minutos hasta disolución total. Llenar hasta la tercera parte de los tubos de ensayo. Esterilizar a 121°C por 15 minutos. Enfriar en pico de flauta profundo.|
Pluripeptona | 20.0 | |
Cloruro de sodio | 5.0 | |
Lactosa | 10.0 | |
Sacarosa | 10.0 | |
Glucosa | 1.0 | |
Sulfato de hierro y amonio | 0.2 | |
Tiosulfato de sodio | 0.2 | |Rojo de fenol | 0.025 | |
Agar | 13.0 | |
pH final: 7.3 ± 0.2 |
Siembra
A partir de un cultivo puro, sembrar en TSI, picando el fondo y extendiendo sobre la superficie del medio.Incubación
A 35-37°C durante 24 horas, en aerobiosis.

Resultados
1-Pico alcalino/fondo ácido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
2-Pico ácido/fondo ácido...
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