fosfolipidos

PHOSPHOLIPIDS

Fosfolípidos
CHO-POD. Enzimático colorimétrico
4.
5.

Determinación cuantitativa de fosfolípidos
IVD

Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC.
Leer la absorbancia (A) del patróny la muestra, frente al Blanco de
reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos.

Conservar a 2-8ºC
CÁLCULOS
PRINCIPIO DEL MÉTODO
Los fosfolípidos son hidrolizados por la fosfolipasa D yla colina liberada
es secuencialmente oxidada por la colina oxidasa (CHO) a betaína, con la
simultánea producción de peróxido de hidrógeno. En presencia de
peroxidasa (POD) el peróxido de hidrógenoacopla oxidativamente a la 4Aminofenazona (4-AF) y al diclorofenol formando una quinonamina
coloreada:
Fosfolípidos + H2O

Fosfolipas D
a

Colina + 2O2 + H2O

Colina + Ácido fosfatídicoColinaOxidasa

Betaína + 2 H2O2

POD

2H2O2 + 4-AF + Diclorofenol
Quinona + 4H2O
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de
fosfolípidos presentes en la muestraensayada1,2.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Los fosfolípidos son moléculas lipidicas que contienen fosfatos.
Su función como componente principal de las membranas celulares hace
de los fosfolípidos un elementoesencial para las células.
La determinación de fosfolípidos en suero es un indicador clínico
importante para el diagnóstico de alteraciones del hígado,
fundamentalmente ictericias obstructivas1,2.El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
clínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
R1
Tampón
R2
Enzimas
PHOSPHOLIPIDS CAL

TRIS pH 7,55
50 mM
Diclorofenol
2,1mM
Fosfolipasa D
400 U/L
Colina oxidasa (CHO)
2200 U/L
Peroxidasa (POD)
3600 U/L
4 - Aminofenazona (4-AF)
1 mmol/L
Patrón primario acuoso de Fosfolípidos 300
mg/dL

PREPARACIÓN
Reactivo detrabajo (RT): Reconstituir (
) el contenido de un vial de R 2
Enzimas en 10 mL de R 1 Tampón.
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.
Estabilidad del reactivo reconstituido: 3...