Friccionamiento Subcelular
Páginas: 2 (302 palabras)
Publicado: 6 de mayo de 2012
ACTIVIDAD Nº 1: Fraccionamiento subcelular
A) Fraccionamiento Subcelular de Hígado:
Se nos proporciono un trozo de hígado de pollo, el cual se puso en un mortero de cerámicay con unas tijeras se comenzó picar el trozo de hígado para así facilitar el machacado. Luego la profesora vertió una porción de buffer en el mortero. A la mezcla se extrajo 6ml. con lapipeta de 1ml. vaciándolo a un tubo de ensayo para el proceso de centrifugado, el cual se programo con una duración de 10 minutos a 2500RPM.
El resultado del centrifugado fue unasolución separada por dos fases una liquida y otra con restos sólidos (sedimentación). Del tubo de ensayo se elimino el sobrenadante para poder añadir 3ml. de buffer a la concentraciónsolida restante, a este con una pipeta de 1ml se re suspendió la nueva solución para homogeneizar la sustancia
B) Evaluación del fraccionamiento subcelular mediante marcadoresmoleculares.
En un portaobjetos se coloque una gota de la suspensión preparada junto sobre ella colocando un cubreobjetos con aceite de inmersión. Al observarlo en el microscopio a 40x nose obtuvo ninguna imagen
Haciendo el mismo procedimiento anterior pero agregando azul de tripán al porta objetos, observando en el microscopio a 40x se pudo obtener la imagen delos núcleos del hígado de pollo
ACTIVIDAD Nº 2: Observación de un corte de hígado de Rattus norvegicus (Berkenhout) utilizando el objetivo de inmersión.
Observado por:10x: solo se vio una imagen morada, no se distinguió ningún organelo
40x: se apreciar a los núcleos en una tinción entre azul y morado y el citoplasma rosado. Estas tinciones que seobservan se puede concluir que se ha usado hematoxilina y eosina
100x: se precia en mayor tamaño los núcleos y en el interior de algunos de ellos se pudo observar cromatina condensada.
A) Fraccionamiento Subcelular de Hígado:
Se nos proporciono un trozo de hígado de pollo, el cual se puso en un mortero de cerámicay con unas tijeras se comenzó picar el trozo de hígado para así facilitar el machacado. Luego la profesora vertió una porción de buffer en el mortero. A la mezcla se extrajo 6ml. con lapipeta de 1ml. vaciándolo a un tubo de ensayo para el proceso de centrifugado, el cual se programo con una duración de 10 minutos a 2500RPM.
El resultado del centrifugado fue unasolución separada por dos fases una liquida y otra con restos sólidos (sedimentación). Del tubo de ensayo se elimino el sobrenadante para poder añadir 3ml. de buffer a la concentraciónsolida restante, a este con una pipeta de 1ml se re suspendió la nueva solución para homogeneizar la sustancia
B) Evaluación del fraccionamiento subcelular mediante marcadoresmoleculares.
En un portaobjetos se coloque una gota de la suspensión preparada junto sobre ella colocando un cubreobjetos con aceite de inmersión. Al observarlo en el microscopio a 40x nose obtuvo ninguna imagen
Haciendo el mismo procedimiento anterior pero agregando azul de tripán al porta objetos, observando en el microscopio a 40x se pudo obtener la imagen delos núcleos del hígado de pollo
ACTIVIDAD Nº 2: Observación de un corte de hígado de Rattus norvegicus (Berkenhout) utilizando el objetivo de inmersión.
Observado por:10x: solo se vio una imagen morada, no se distinguió ningún organelo
40x: se apreciar a los núcleos en una tinción entre azul y morado y el citoplasma rosado. Estas tinciones que seobservan se puede concluir que se ha usado hematoxilina y eosina
100x: se precia en mayor tamaño los núcleos y en el interior de algunos de ellos se pudo observar cromatina condensada.
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