Fundamentos de hplc

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE QUÍMICA EXPERIMENTAL E INVESTIGACIÓN

CURSO DE CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA PERFORMANCE-HPLC
COMISIÓN ENCARGADA DE IMPLEMENTACIÓN DEL ÁREA DE INVESTIGACIÓN-LQEI-UNP INVESTIGACIÓN LQEI UNP ING. BRUNO J. CHUNGA PURIZACA ING. ING ALFREDO FERNANDEZ REYES ING. KARINA L. LOZADA CASTILLO
AUSPICIA:

¿ QUÉES LA CROMATOGRAFÍA ?
MICHAEL TSWETT REALIZÓ A LA SU PRIMERA MÉTODO SEPARACIÓN EN COLUMNA DE PIGMENTOS DE CLOROFILA, LLAMANDO “CROMATOGRAFÍA” ES UN MÉTODO DE SEPARACIÓN DE ESPECIES QUÍMICAS PARAIDENTIFICARLAS CUALITATIVA O CUANTITATIVAMENTE.
J. Chem. Ed. 36, 144, 1959 J. Chem. Ed. 44, 235, 1967

ELUYENTE (FASE  ) MÓVIL)

COLUMNA O  PLACA (FASE  ESTACIONARIA) )

ELUATO ¿Qué es la Cromatografía? é l fí ?
Es un método de separación de mezclas en sus constituyentes individuales Tiene dos finalidades: Purificación Análisis

MEDICINA DEL DEPORTE ANTI-DOPING

FARMACOLOGÍA Í

CROMATOGRAFIA

INVESTIGACIÓN Ó QUÍMICA Y BIOQUÍMICA INVESTIGACIÓN EXTRATERRESTRE

¿POR QUÉ SE LLAMA CROMATOGRAFÍA? ¿ Q
KHROMATOS (Color) GRAPHOS (Escritura)

MIGUEL TSWEET (BOTANICO RUSO-1906).REALIZO LA PRIMERA CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA.
Eter de petróleo Eter de petróleo Eter de petróleo

Mezcla de pigmentos vegetales g CaSO4

Inicios de la Cromatografía… Inicios de la Cromatografía…
Es una técnica de separación basada en la diferente velocidad con que se mueven los solutos a través de un medio estacionario mediante el flujo en un disolvente llamado eluente o fase móvil móvil. F. F.Runge químico alemán, describió el proceso de separación que actualmente se conoce como cromatografía en papel. El ruso Mijail Tswett corresponde el haber establecido las ventajas de la cromatografía y la adopción parcial de la terminología, también fue quien sentó las bases de los principales procedimientos experimentales relativos a ésta técnica.

Inicios…
A pesar de que el método g pcromatográfico prometía simplificar la separación de sustancias de mezclas complejas, complejas no fue sino hasta finales de la década de los 30 y principios de los 40 cuando se empezó a desarrollar la técnica teniendo este método diversas aplicaciones. Las únicas sustancias que p no pueden ser examinadas por cromatografía son las insolubles y aquellas que se descomponen con el solvente o con la faseestacionaria.

SÓLO EL 20% (APROX ) DE LOS COMPUESTOS CONOCIDOS (APROX.) PERMITEN SER ANALIZADOS POR CROMATOGRAFÍA DE GASES. LIMITADA POR VOLATILIDAD E INESTABILIDADTÉRMICA HIGH PERFOMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY) ESPECIES LA HPLC (CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTO RENDIMIENTO, PUEDE IÓNICAS, ETC. SEPARAR PRODUCTOS MACROMOLÉCULAS, NATURALES,

POLÍMEROS,

PROTEÍNAS,

USANDO FASES MÓVILESLÍQUIDAS LA HPLC PRESENTA MAYOR VARIEDAD DE FASES

ESTACIONARIAS QUE LA CG.

Métodos:
MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS S M LES SIMPLES PAPEL EL PLACA L COLUMNA L INSTRUMENTALES NS UMEN LES GASES E L Q D LÍQUIDOS

¿ QUÉ TIPOS DE ES LA CROMATOGRAFÍA EXISTEN?

CLASIFICACIÓN PRINCIPAL:
•CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA •CROMATOGRAFÍA EN PAPEL Y CAPA FINA

TIPOS DE CROMATOGRAFIA:
1. Cromatografía de CapaFina (Thin-layer Chromatography - TLC) TLC). 2. Cromatografía de Alta Performance en Capa Fina (High performance Thin-layer Chromatography Thin layer HPTLC). 3. Cromatografía de Columna (Column Chromatography). 4. Cromatografia de Gases (Gas Chromatography - GC). 5. 5 Cromatografia Líquida de Alta Performance (High performance liquid Chromatography - HPLC). 6 Cromatografia 6. C o atog a a deFluido Supercrítico (Supercritical u do Supe c t co (Supe c t ca Fluid Chromatography - SFC). 7. Electroforesis Capilar (Capillary electrophoresis - CE).

LA INFORMACIÓN QUE NOS PROPORCIONA EL CROMATOGRAMA
PARÁMETROS A CONSIDERAR
1. GASTO: RAPIDEZ DE LA FASE MOVIL EN
UNA COLUMNA (mL/min)

2. TIEMPO DE RETENCIÓN tRI: TIEMPO QUE
TOMA AL ELUYENTE TRANSPORTAR HASTA EL CUALQUIER COMPONENTE...
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