Genética forense

Genética Forense

PCR
Reacción en Cadena de la Polimerasa o Polymerase Chain Reaction (PCR) es una técnica utilizada para amplificar VNTRs (cuestiones forenses) de DNA ycopiarlos, fue creada por el bioquímico estadounidense Kary Mullis en 1987. La PCR esta basada en una reacción de síntesis de DNA llevada a cabo por la enzima Taq Polimerasa, la cuales resistente a la temperatura.

Material:
• Muestra de DNA
• Polimerasa
• Primers
• Dinucleótidos Trifosfatos
• Termociclador

La técnica del PCR se realiza en unTermociclador, el cuál nos permite calentar y enfriar una reacción en corto tiempo.
1. Desnaturalizar: Este primer paso tiene como objetivo abrir la cadena de DNA y obtener dos simples;para lograrlo, se tiene que calentar la muestra de DNA a 94º C. (1 minuto)
2. Apareamiento: Aquí, se tiene que pegar las señales de inicio y fin a través de Primers (los cuálesson previamente diseñados), éstos reaccionan con las cadenas sencillas de DNA y se adhieren por complementariedad. En este paso es importante bajar la temperatura a 52ºC para quese formen Puentes de Hidrógeno y permita que se comience a copiar el DNA. (30 segundos)
3. Extensión: En este paso, una Polimerasa de DNA (Taq) extiende los Primers y colocaDinucleótidos Trifosfatos; es necesario aumentar la temperatura a 72ºC para que la enzima empiece a trabajar y la polimerasa comience a copiar. (1 minuto)
4. Finalmente, se repitenel ciclo y se pueden obtener varias copias de DNA.
El tiempo total de la prueba es de 2 horas.

Aplicaciones del PCR
En criminalística es utilizado el PCR cuando no se tienesuficiente muestra genética sobre una escena del crímen, por ejemplo: cuando se encuentra un cabello, es importante que pase por este proceso para aumentar la cantidad de DNA.