hidrolisis del almidon

BIOQUÍMICA
HIDRÓLISIS ENZIMATICA DEL ALMIDON


OBJETIVO
REALIZAR LA HIDRÓLISIS ENZIMATICA DEL ALMIDO MEDIANTE EL METODO DE ESPECTROMETRIA
FUNDAMENTO
Un espectrofotómetro es un instrumentousado en la física óptica que sirve para medir, en función de la longitud de onda la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativa a dos haces re radiación.
También son utilizados enlaboratorios de química para cuantificar sustancias y microorganismos
Este instrumento tiene la capacidad de proyecta un haz de luz monocromática a través de una muestra . esto le permite aloperador realizar dos funciones.
Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en muestra.
Indicar indirectamente que cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la muestra
Paravalorar una muestra se prepara una solución de la muestra desconocida en el mismo disolvente utilizado para las muestras de concentración conocida. La concentración estimada para esta solución deberáestar dentro del rango.
MARCO TEORICO
La amilasas es una enzima del grupo de las hidrolasas , se producen principalmente en la fracción endocrina del pancera ye n las glándulas salivales(alfa 1.4 glucan4 glucanohidrolasa)
El sustrato (almidona) tamponado se incuba en la muestra, produciéndose la hidrólisis enzimática, esta se detiene por el degrado de solucione lugol que al mismo tiempo producecolor con el remanente de almidón no hidrolizado
La disminución del color respecto a un sustrato control en la medida de la actividad enzimática.
PROCEDIMIENTO
Materiales
EspectrofotómetroPipetas
Tubos de ensayo
Cubetas
Puntera
Micropipetas
Baño maria
Cronometro

Reactivos
Rvo1 sustrato (sol amidon 0.5 gr/ml PH=7)
Rvo2 lugol
Muestra suero saliva y orina
CONDICIONES DEREACCION
Longitud de onda 640 nm
Temperatura 37 0C
Volumen de muestra 20ul o 0.02 ml
Procedimiento
Preparar el sustrato
0.5mg almidon 1 ml
X 5 ml...