Histologia y tinciones

TÉCNICAS HISTOLOGICAS

INTRODUCCIÓN:
Histología, estudio microscópico de los tejidos —grupos de células similares interrelacionadas que cooperan para llevar a cabo una función biológica determinada— de animales y plantas.
El progreso de la histología ha sido lento hasta el siglo XIX, en el que el microscopio empezó a adquirir una forma parecida a la actual y el microtomo, un instrumento quepermite realizar finos cortes de tejidos, fue inventado por el fisiólogo checo Jan Evangelista Purkinje.
En el cuerpo de un animal se distinguen cinco grupos principales de tejidos: el epitelio, que se encuentra en todas las superficies de revestimiento corporales y en las áreas de secreción, el tejido conjuntivo, que incluye los huesos, los cartílagos y otras estructuras de soporte; el tejidomuscular, el tejido nervioso.

La técnica histológica es una serie secuencial de pasos a través de los cuales una muestra de tejido llega a transformarse en delgados cortes coloreados capaces de ser observados al microscopio.

Sinopsis General |
Paso | Objetivos | Medios usuales |
Obtención | Proveer el material para su uso en el microscopio | Biopsia Resección quirúrgica Autopsia|
Fijación | Preservar el material Eliminar los microorganismos | Formol al 10%Bouin Glutaraldehido |
Inclusión | Embeber el material en un mediofácil de cortar en láminas muydelgadas | Parafina- Acrílicos- Resinas Epoxi |
Corte | Lograr láminas muy delgadas quesean atravesadas por la luz | Micrótomo rotatorio-M. de deslizamiento- Ultra micrótomo |
Coloración | Visualizar lostejidos- Identificar moléculas en ellos(Histoquímica) | Hematoxilina - eosina- Tricrómicos- Histoquímica |
Montaje | Preservar el corte, manteniéndoloaislado del aire y deshidratado | Bálsamo del Canadá- Medios plásticos |

Proceso

OBTENCIÓN:

Consiste en la provisión del material que se desea estudiar por medio del microscopio. El método seleccionado debe ser el adecuado para cada tipo dematerial. En todos los casos el instrumental con el cual se seccionan los tejidos debe estar muy afilado para evitar aplastar sus elementos, así como se debe evitar cualquier otro tipo de maltrato en su manipulación. Los principales métodos empleados son: la biopsia, la resección quirúrgica y la autopsia.
Cualquiera sea el procedimiento empleado para la obtención, el material que resulta del mismodebe ser inmediatamente fijado o congelado para evitar los procesos de autodestrucción de las células conocidos como autolisis.

* Necropsia: Examen u obtención de tejido de un organismo muerto.
* Biopsia:(del griego bios= vida y oasis = visión) Examen u obtención de tejido de un organismo vivo. Puede ser inscisional, excisional, por sacabocado, por punción y absorción, por raspado,por trepanación.
* biopsia inscisional: se realiza seccionando con instrumentos cortantes como el bisturí.
* biopsia por punch: el punch es un instrumento filoso con forma de sacabocados que se utiliza para tomar biopsias de piel.
* biopsia por punción: se realiza con agujas de biopsia y recientemente también con agujas del tipo intramuscular (micro biopsia).
* biopsiaendoscópica: se hace a través de endoscopios, que son instrumentos flexibles que permiten la observación de algunas cavidades internas del organismo.
* Recomendaciones:
-para la identificación de la muestra se usa una cartulina resistente donde se escribe con lápiz las indicaciones (órgano, porción, etc) para evitar la confusión de muestras.
-Los trozos de órganos tubulares se seccionan directamentecon tijeras, los macizos han de ser “desprendidos” con las tijeras. Extraidos los órganos deben seccionarse en fragmentos con una hoja de afeitar o de bisturí (se utilizan a manera de serrucho sin presionar).

FIJACIÓN:
Tiene como finalidad la conservación la morfología y composición química de las células y del tejido, dura alrededor de 12 hrs. Dependiendo del fijador y del tamaño de pieza...