Identificación De Bacterias Por Pcr (Generalidades)

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Revista Latinoamericana de

MICROBIOLOGÍA

Vol. 49, Nos. 1-2
January - March. 2007
April - June. 2007
pp. 19 - 24

Artemisa
en línea

ORIGINAL ARTICLE

Confirmation of presumptive Salmonella colonies
contaminated with Proteus swarming using the
Polymerase Chain Reaction (PCR) method
Rosalba Gutiérrez Rojo,* Edith Torres Chavolla*

ABSTRACT. In México, zerotolerance regulation is practiced regarding Salmonella in food products, the presence of which is verified by the procedure described in NOM 114-SSA-1994. During
the period between August 2002 and March 2003, 245 food samples were tested using this procedure in the Central Laboratories of
the Department of Health for the State of Jalisco (CEESLAB). Of
these 245 samples, 35 showed presumptive coloniescontaminated
with Proteus swarm cells even after selective isolation. These swarm
cells make Salmonella recovery and biochemical identification difficult due to the occurance of atypical biochemical profiles which
generally correspond to that of Proteus. Out of the 35 samples contaminated with Proteus , 65 presumptive colonies were isolated.
These colonies were analyzed using both normativemicrobiological method and Polymerase Chain Reaction (PCR). The PCR method detected two positive samples while normative microbiological
method was not able to identify. In order to determine the extent of
interference of Proteus swarming on the Salmonella-specific PCR
band amplification, Salmonella ser. Typhimurium was grown in the
presence of Proteus swarming. These results show that Proteusswarming did not interfere with Salmonella PCR-amplification, although the appearance of Salmonella was altered such that the
black precipitate was no observed in the presence of Proteus
swarming. Ours result indicate that the PCR method used in this
study may be successfully applied to confirm presumptive Salmonella colonies contaminated with Proteus swarming.

RESUMEN. En México lasregulaciones sanitarias exigen tolerancia
cero para Salmonella en productos alimenticios y la presencia de
Salmonella es verificada de acuerdo con el procedimiento descrito en
la NOM 114-SSA-1994. Durante el periodo comprendido entre agosto del 2002 y marzo del 2003, fueron obtenidas 245 muestras de
alimento y analizadas utilizando este procedimiento en el Centro Estatal de Laboratorios (CEESLAB) dela Secretaría de Salud. De las
245 muestras, 35 presentaron colonias sospechosas de Salmonella
contaminadas con swarming de Proteus en la etapa de aislamiento
selectivo. Este fenómeno dificulta tanto la recuperación como la
identificación bioquímica de Salmonella, produciendo un perfil bioquímico atípico que generalmente corresponde al de Proteus. De las
35 muestras contaminadas con swarming,se recuperaron 65 colonias
sospechosas. Estas colonias fueron analizadas por el procedimiento
microbiológico y por Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR).
La PCR detectó dos muestras positivas que el método microbiológico
no fue capaz de detectar. Con la finalidad de determinar el grado de
interferencia del swarming en la amplificación de la banda específica
de Salmonella por PCR,cultivos de Salmonella ser. Typhimurium,
fueron contaminados de forma artificial con swarming de Proteus.
Los resultados demostraron que el swarming no interfiere en la reacción de amplificación por PCR, aunque la apariencia de las colonias
sospechosas estaba alterada debido a que el precipitado negro característico no se observó en presencia del swarming de Proteus, a pesar de estar creciendo enmedios selectivos. Estos resultados indican
que el método de PCR utilizado en este estudio, puede ser utilizado
con éxito para la confirmación de colonias sospechosas de Salmonella contaminadas con swarming de Proteus.

Key words: Foods, PCR, Proteus, Salmonella, swarm cells.

Palabras clave: Alimentos, PCR, Salmonella, swarming de Proteus.

INTRODUCTION
Salmonella is one of the most common...