Informe practicas

U NI VE R S I D AD NACI ONAL F E D E R I CO VI L L AR R E AL
F ACU L T AD D E CI E N CI AS NAT U R AL E S Y MAT E MAT I CAS L abor at or io de B ioquím ica y B iología Molecu lar _______________________________________________________

GU I A D E P R ACT I CAS

B I OL OGÍ A M OL E CU L A R

AU T OR E S :

B iól .W .I s r ael B ar r ant es B us t i nz a Mg. Car l os S ant a Cr uz Car pi oL im a, Agos t o de 2 0 0 2 .

I srael Barrantes israelbarrantes@universia.edu.pe Lab.Bioquímica y Biol.Molecular UNFV

T abla de C ontenidos
Presentación ........................................................................... 3 M edidas de Biosegur idad ............................................................. 4 Aisl amiento de Ácidos Nucleicos.................................................... 5 Electr ofor esis de Ácidos Nucleicos................................................ 10 C onamiento Molecular ............................................................. 14 l Amplificaciones ...................................................................... 18 T ransferencia de Ácidos Nucleicos................................................ 21 Apéndice No.1: Relacionesde Uso Fr ecuente en Biol ogía M ecular . ...... 23 ol Apéndice No.2: C omposición de Buffers y Sol uciones Stock. ................. 24 Apéndice No.3: Guía de Pr obl emas. .............................................. 26 Bibliografía........................................................................... 28

Biól.I srael Barrantes israelbarrantes@universia.edu.pe Lab.Bioquímica yBiol.Molecular UNFV

Presentación
El Laboratorio de Bioquímica y Biol ogía M olecular de la Facultad de C iencias Natur ales y M atemáticas de la Univer sidad Nacional Feder ico Villar r eal presenta esta Guía de Pr ácticas par a el C so de Biología M ecular . Las ur ol prácticas que se han incluido tienen la finalidad de familiar izar al alumno con los métodos de mayor importancia en la Biología actual.Pocas univer sidades de nuestr o país están en la capacidad de br indar a sus estudiantes prácticas del nivel que aquí se propone, por lo que es necesario compr ender el esfuerzo que hacen los pr ofesores integr antes del Labor ator io en proporcionar l os mater iales y reactivos que se usar án dur ante las prácticas, y sean aprovechados al máximo. Lima, Agosto del 2,002. Profesor es del C so deBiología M ur olecular : Biól. W.Isr ael Bar r antes Bustinza. M C los Santa C uz C pio. g. ar r ar

I srael Barrantes israelbarrantes@universia.edu.pe Lab.Bioquímica y Biol.Molecular UNFV

M edidas de Bioseguridad
1. Asumir de que toda muestr a que contiene fluidos biológicos es potencialmente patógena, dado de que no existe un método que garantice la inocuidad total . 2. Usar mandil durante todo el tiempo que se per manezca en el laboratorio, par a pr oteger l a r opa y el cuerpo, y vestir apropiadamente de acuer do al procedimiento a r ealizar, es decir, usar mascar ill a, guantes y cubrir el cabello de ser necesario. 3. No inger ir al imentos ni fumar en el interior del laborator io. Algunas sustancias tóxicas tienen la capacidad de ser volátiles y por lo tanto se encuentr an trazas de ellas suspendidas en el air e. 4. Leer cuidadosamente el procedimiento a seguir durante una práctica, con el obj eto de luego estar al tanto de las consideraciones de seguridad específicas de cada reactivo utilizado (Par a tal fin se r ecomienda leer los Mater i al Saf ety Data Sheet que viene incl uido con cada r eactivo) 5. No utilizar la llama del mecher o sin cer ciorar se antes deque no haya cerca l íquidos inflamables, ni mantenga el mecher o o cocina encendida sin necesidad. 6. Descontaminar apr opiadamente: El ár ea de tr abaj o deberá siempr e cubr ir se con papel toalla o absorvente. Los mater iales descar tables deber án ser desechados de acuer do a l a natur al eza del mater ial (vidrios, derivados del caucho o del plástico, etc.). Los r eactivos o r estos de r...