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Páginas: 2 (295 palabras) Publicado: 1 de abril de 2013
Descripción y manipulación de las suspensiones celulares

Las suspensiones celulares consisten en células libres y agregados celulares distribuidos en un medio en movimiento. Estassuspensiones pueden ser permanentes mediante el suministro continuo de nutrimentos. Medios de cultivo Para el cultivo de suspensiones celulares de una gran variedad de plantas se ha utilizado el medio MSdesarrollado por Murashige y Skoog (1962) para el cultivo de tejidos de tabaco, como también el medio B-5 de Gamborg et al. (1968). También se han utilizado otros medios, pero su composición nodifiere mucho de los citados. A menudo, los medios óptimos para la inducción y crecimiento de callos a partir de explantes primarios no son los mismos que para el establecimiento de suspensionescelulares; el nivel óptimo de auxinas y citocininas, p.ej. puede ser diferente (Torrey et al., 1961). En ocasiones las células en suspensión necesitan de suplementos orgánicos, aminoácidos, CH, ex-tracto de levadura, y AC; la auxina más utilizada es 2,4-D. Iniciación de las suspensiones Las suspensiones celulares se inician generalmente mediante la incubación de trozos de callos friablesen medios líquidos que, están en movimiento continuo. Comúnmente se emplean matraces Erlenmeyer, en los cuales se deposita el medio líquido con los trozos de callo dispersos en el, hasta llenaraproximadamente 1/5 de la capacidad de tos frascos; estos se ponen luego a incubar en un agitador giratorio a 80-150 rpm, bajo luz continua y a 25 °C de temperatura. Mediante subcultivos semanales,las suspensiones celulares quedan establecidas después de varios días. Durante los primeros subcultivos es recomendable usar una tasa de dilución baja (por ej. 1:1 a 1:4) utilizando cuatropartes de medio fresco por cada parte de suspensión celular. Posteriormente se puede utilizar una tasa de dilución más alta, según el objetivo para el cual se haya establecido la suspensión.
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