inmunologia

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
UNIDAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
FACULTAD DE BIOANALISIS
LICENCIATURA EN QUIMICA CLINICA



M. en C. Rosa Estela Sandoval Pérez
Inmunohematologia













Compilador: Efraín Lozano Carmona




Xalapa, Ver a 28 de abril de 2011














MANUAL DE LABORATORIO DE INMUNOHEMATOLOGIA

INDICEPRACTICA #14
CUANTIFICACION DE HEMOGLOBINA
OBJETIVO
Determinar la concentración de hemoglobina en sangre por el método de cianometahemoglobina.

INTRODUCCION


FUNDAMENTO
En este método la hemoglobina reacciona con el ferrocianuro de potasio formando cianomnetahemoglobina. La densidad óptica de este pigmento es medida a 540nm comparada con unpatrón conocido.

MATERIAL
Gradilla
1 pipeta graduada de 5ml
1 pipeta Sahli con boquilla
2 tubos de ensaye 13x100
Papel parafil
Espectrofotómetro filtro 540nm
Solución de cianometahemoglobina (Drabkin)
Solución patrón de hemoglobina de 60mg/dl
Sangre problema con anticoagulante

PROCEDIMIENTO
1. Colocar en un tubo de ensaye de 13x100 5 ml de solución Drabkin.
2. Con una pipeta deSahli agregar 0.02ml de sangre problema.
3. Tapar el tubo con papel parafil mezclarlo por inversión y dejarlo reposar por 10min.
4. Leer la absorbancia a 540nm ajustando a 100% con blanco de cianometa.
5. Convertir el porcentaje de absorbancia en gramos de hemoglobina por decilitro usando la solución patrón para obtener el factor de calibración.

Concentracióndel estándar
Factor de calibración =
Absorbancia

Concentracion de Hb= absorbancia Pb x factor

RESULTADOS
Se anexa una curva de calibracion

VALORES DE REFERENCIA

Hombres
14.0-18.0 gr/100ml
Mujeres
13.5-16.0 gr/100ml





INTERPRETACION CLINICA
BIBLIOGRAFIA CITADA















PRACTICA #15DETERMINACION DE HEMATOCRITO
OBJETIVO
Determinar el volumen de hematocrito en sangre por el método de microhematocrito.
INTRODUCCION
FUNDAMENTO
El volumen globular o el volumen de hematocrito, es el porcentaje de células rojas en relación a la cantidad total de sangre.
MATERIAL
Gradilla
Tubos capilares
Lector de hematocrito
Micro centrifuga
Mechero Bunsen
Sangre problema con anticoagulantePROCEDIMIENTO
1. Llenar las dos 2/3 partes del tubo capilar con la sangre problema (mezclar por inversión).
2. Sellar el capilar por el extremo opuesto con la flama del mechero rotándolo para que el sellado sea uniforme.
3. Centrifugar de 5 a 8 minutos a 12000 rpm
4. Tomar la lectura con el lector de hematocrito. En caso de no contar con un lector utilizar una regla mediante las alturas devolumen de eritrocitos y de volumen total de la muestra de la siguiente forma:


Hematocrito: Altura de eritrocitos x 100
altura del volumen


VALORES NORMALES

Hombres
50-55 ml%
Mujeres
42-48 ml%
Recién nacidos
44-54 ml%
Niños de 1 año
35 ml%
Niños de 10 años
37.5 ml%


RESULTADOS
Regla de 3:
44 ---------------------100 x= 36.3636%
16---------------------x
INTERPRETACION CLINICA


BIBLIOGRAFIA CITADA

























PRACTICA #16
DETECCION DE ANTICUERPOS NO TREPONEMICOS (RPR)

OBJETIVO


INTRODUCCION


FUNDAMENTO


MATERIAL
Gradilla
4 tubos de ensaye 12x75
1 pipeta Pasteur con bulbo
3 pipetas graduadas de 1ml (1/10)
1 pipeta de 0.1ml (0.01/0.1)
Solución salina fisiológica
Rotadormecanico
Suero problema
Reactivos: Suspensión de antígeno RPR
Control positivo RPR
Control negativo RPR

PROCEDIMIENTO
Preparacion del antígeno:
La suspensión del antígeno esta lista para usarse. Debe agitarse por 5 a 10 segundos antes de utilizarse para resuspender las partículas de carbón.

I.- PRUEBA CUALITATIVA
1. Poner a temperatura...