Introduccion estructura proteinas

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ANALISIS ESTRUCTRAL DE LAS PROTEINAS
La cantidad de AA se puede determinar por métodos químicos o enzimáticos.
1. Reactivos químicos:
* SANGER: Emplea 2,4 Dinitrofluorobenceno (DNF), ensolución ligeramente alcalina y a temperatura ambiente, este pasa a ser parte del polipéptido en el N terminal, posteriormente este se hidroliza, quedando el dinitrofenil aminoácido de color amarillo y losotros aminoácidos en estado libre.
* EDMAN: Se hace reaccionar la proteina con fenilisotiosianato que se combina con el grupo a amino libre de la Valina, posteriormente se coloca el péptido conácido diluido y frió, lo que separa la Valina de la cadena principal.
* BROMURO DE CIANOGENO: Separa los enlaces peptídico por el lado carboxilo de los residuos de metionina dejando nuevas unidadespeptídicas.
* CLORURO DE DANSILO: Se utiliza para marcar el péptido que después se hidroliza con HCl, se identifica por sus características cromatográficas. Suele utilizarse el cloruro de dansiloporque forma derivados altamente coloreados que se detectan con alta sensibilidad. Este reacciona con el amino libre de una amina para formar un derivado sulfoamidico, que resulta estable en lascondiciones que permite hidrolizar los enlaces peptídico.
2. Reactivos enzimáticos:
* TRIPSINA: La tripsina es un enzima proteolítica del jugo intestinal. Hidroliza los péptidos por el ladocarboxílico de los residuos de Argina y Lisina.
* CARBOPÈPTIDASAS: Hidroliza al enlace peptídico en que interviene el residuo terminal COOH, de esta manera se determina el aminoácido, que se libera poracceso de la carboxipeptidasa sobre el polipéptido. Conociendo los residuos amino y carboxilo terminal se establecen puntos de referencia importantes en la secuencia de aminoácidos.
*AMINOPEPTIDASA: Hidroliza al enlace peptídico en que interviene el residuo terminal NH2.
* La quimotripsina Facilita la rotura de enlaces peptídicos por reacciones hidrolíticas, El principal sustrato de la...
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