Ionización por electrospray

Ionización por Electrospray (ESI):

ESI comenzó cuando demostraron que los iones múltiplemente cargados se obtuvieron a partir de proteínas, lo que permite su peso molecular para determinar coninstrumentos cuya masa alcance es limitado a tan bajo como número 2000. al principio, ESI es una fuente de ionización dedicada al análisis de proteínas, polímeros, biopolímeros y análisis de pequeñasmoléculas polares. ESI tiene una sensibilidad muy alta.1

La técnica de Fenn consiste en una disolución de proteína 10 micromolar en un medio ácido se introduce en un capilar metálico al que se leaplica corriente, generando un spray de iones que pueden viajar a través del gas inerte que fluye por el capilar (N) y entran al analizador del equipo de masas. Este sistema lleva proteínas ionizadas ala fase gas, pero para poderlas ver en el analizador tienen cargas altas para que la relación masa-carga sea del orden de compuestos de bajo peso molecular.1

Esta técnica, permite protonar lospéptidos fácilmente y hacerlos iones. Por otro lado para los carbohidratos que se caramelizan a altas temperaturas, se usan iones sodio para convertirlos en iones sin tener que derivatizarlos.2

Unacaracterística de la ESI es su sensibilidad a la concentración, y no a la cantidad total de la muestra que se inyecta en la fuente, como es el caso para la mayoría de otras. La intensidad de las señales delos dos compuestos monitoreados se mide mientras se inyecta el flujo total de una columna HPLC, 400μl por min, O un parte de este flujo, después de dividir. Como puede verse, la sensibilidad aumentaun poco cuando el flujo entrar en la fuente se reduce. Esto sigue siendo cierto a los flujos de tan bajo como algunos nanolitros por minuto. Cuando las tasas de flujo más alta son cerca de 500μlmin lasensibilidad se reduce.1
 Por otra parte, por la misma cantidad de la muestra, un Columna de HPLC con un diámetro inferior, y el uso de pequeños caudales, dará un incremento de la sensibilidad,...