Kligler hierro agar

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  • Publicado : 11 de noviembre de 2010
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Kligler Hierro Agar.
Medio de cultivo frecuentemente usado en microbiología de alimentos para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa y lactosa, y a la producciónde ácido sulfhídrico.
Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona de carne y la tripteína, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son los hidratosde carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe 3+, los cuales se combinancon el ácido sulfhídrico y  producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El agar es el agente solidificante.Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro dehidrógeno el que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro de color negro.
Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
Peptona de carne | 13.0 | Suspender 54.8 g del polvo por litro de agua destilada. Mezclar bien y calentar con agitación frecuente, hervir 1 o 2 minutos hasta disolución total. Llenar hasta la tercera parte de los tubos de ensayo.Esterilizar a 121°C por 15 minutos. Enfriar en pico de flauta profundo. |
Cloruro de sodio | 5.0 | |
Lactosa | 10.0 | |
Tripteina | 10.0 | |
Glucosa | 1.0 | |
Citrato de hierro y amonio |0.5 | |
Tiosulfato de sodio | 0.3 | |
Rojo de fenol | 0.025 | |
Agar | 15.0 | |
pH final: 7.3 ± 0.2 |
Siembra
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, sembrar el mediode cultivo, picando el fondo y extendiendo sobre la superficie del medio.
Incubación
A 35-37°C durante 24 horas, en aerobiosis.
Resultados

1-Pico alcalino/fondo ácido (pico rojo/fondo...
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