Laboratorio coromosomas

INFORME DE LABORATORIO

CULTIVO DE LINFOCITOS

PRESENTADO POR:
OBJETIVOS

* Realizar por medio de una técnica especial el cultivo de linfocitos de sangre periférica
* Estimular elcrecimiento de linfocitos para observar sus fases de crecimiento celular
* Observar y analizar los cromosomas extraídos de linfocitos con ayuda del microscopio.

INTRODUCCIÓN

CULTIVO DELINFOCITOS
MATERIALES
* Sangre ( 4 -5 Gotas)
* La Fitohemaglutinina
* RPMI – 16 – 4 (4.5 ml)
* SBF (Suero Bobino Fetal)
* Colchisina
* Tubos de centrifuga
* Incubadora
*Sustancia hipotónica (0.75M)
* Pipetas
* Fijador (1ml)
* Reactivo giemsa 6 %

1. Adicionamos
* Sangre (4 – 5 gotas)

* Fitohemaglutinina (5- 6-7-8 gotas): Estimula la mitosis(mitogeno).

La fitohemaglutina (conocida como PHA por la abreviación de phytohemaglutinin). Es una lectina hemaglutinina, una lectina vista en posición lateral. Las lecticinas con proteínas que seunen a azucares con una elevada especificidad para cada punto distinto. Su principal papel está en los fenómenos de reconocimiento, tanto a nivel molecular como celular. Por ejemplo, algunas bacteriasutilizan lectinas para acoplarse a las células de organismos hospedadores durante la infección.
La PHA fue reconocida por su capacidad para aglutinar eritrocitos y leucocitos. Además estimulainespecíficamente la proliferación de células T y es esta característica mitogenica l que le da su principal aplicación.

* RPMI – 16 -40 (4.5ml): Tiene todos los aminoácidos esenciales para que puedancrecer los linfocitos.

* SBF (Suero Bobino Fetal) (0.5ml): complemento del medio rico en proteínas Para simular las condiciones de vida humana.

* COLCHISINA: paraliza o detiene la mitosis enla etapa de la metafase, esto lo hace porque inhibe los genes que forman la tubulina del huso y por eso los cromosomas se quedan en la metafase.

Lo primero que hicimos fue estimular la...
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