laboratorio espectofotometria

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
FACULTAD DE MEDICINA

BIOLOGÍA DE LA CÉLULA I

Practica Nº3. ESPECTROFOTOMETRÍA
Presentado a Prof. Wilmer Soler Terranova

MEDELLÍN, ABRIL DE 2014

1.

Contenido
INTRODUCCIÓN ......................................................................................... 4

2.

MARCO CONCEPTUAL.............................................................................. 5
2.1. Espectrofotometría: ............................................................................... 5
2.1.1. Transmitancia: ................................................................................. 5
2.1.2

Absorbancia .................................................................................... 6

2.2

Ley de Bourguer – Lambert – Beer........................................................ 7

2.3

Colorimetría: .......................................................................................... 7

3.

OBJETIVOS................................................................................................. 8

4.

METODOLOGÍA .......................................................................................... 9
4.14.2

5.

Materiales .............................................................................................. 9
Procedimiento ...................................................................................... 11

RESULTADOS .......................................................................................... 12
5.1

Eosina.................................................................................................. 12

5.2

Verde de janus ..................................................................................... 14

6.

ANÁLISIS Y DISCUSIÓN .......................................................................... 17

7.

CONCLUSIONES ...................................................................................... 19

8.BIBLIOGRAFÍA .......................................................................................... 20

9.

ANEXOS .................................................................................................... 21
9.1

Cálculos ............................................................................................... 21

9.1.1

CálculosEosina............................................................................. 21

9.1.2

Cálculos Verde de janus ............................................................... 24

9.2

Fichas de seguridad............................................................................. 26

9.2.1

Ficha de seguridad de eosina ....................................................... 27

9.2.2

Ficha de seguridad de verdede janus .......................................... 28

2

Contenido Figuras
Figura 1. Espectro de colores. ............................................................................ 5
Figura 2. Esquema de funcionamiento del espectrofotómetro. ........................... 6
Figura 3. Rayo incidente y rayo emergente. ....................................................... 7
Figura 4.Esquema de funcionamiento del colorímetro. ...................................... 7

Contenido Tablas
Tabla 1. Valores obtenidos con eosina en el espectrofotómetro, Tubo 5
(relación 1/1) ..................................................................................................... 12
Tabla 2. Valores obtenidos con eosina en el espectrofotómetro, tubos 1, 2, 3 y
4; a 500 λ.......................................................................................................... 13
Tabla 3. Valores obtenidos de verde de janus en el espectrofotómetro, Tubo 5
(relación 1/1) ..................................................................................................... 14
Tabla 4. Valores obtenidos con verde de janus en el espectrofotómetro, tubos
1, 2, 3 y 4; a 600 λ...