Leche

Páginas: 5 (1231 palabras) Publicado: 23 de junio de 2011
MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS Resumen de las prácticas de Microbiología de Alimentos

1° Ingeniero Técnico Agrícola Industrias Agrarias y Alimentarias CURSO 2004-2005

Profesora: Cristina Solano Goñi e-mail: cristina.solano@unavarra.es Tfno. Contacto: Instituto de Agrobiotecnología 948-168024

RECUENTO DE AEROBIOS MESÓFILOS (ISO 4833, 2003)

10 g muestra 90 ml caldo peptona Dilución 10-1Homogeneizar (2 min Stomacher)

Filtrar y preparar diluciones seriadas

10-2

10-3

10-4

1 ml

1 ml

1 ml
Suspensión madre: 45 min a Tª amb como máximo, antes de añadir el medio

X2 Añadir PCA 15-20 ml, 45-50 °C Agitar homogeneizando

30 ±1 °C 72 ±3 h

Recuento placas Colonias 15-300

RECUENTO DE ENTEROBACTERIAS EN PLACA (ISO 7402, 1993) 10 g muestra 90 ml caldo peptonaDilución 10-1 Homogeneizar (2 min Stomacher)

Filtrar y preparar diluciones seriadas

10-2

10-3

10-4

1 ml

1 ml

1 ml
Suspensión madre: 45 min a Tª amb como máximo, antes de añadir el medio

X2 Añadir VRBG 15-20 ml, 45-50 °C Agitar homogeneizando Añadir doble capa

37 ±1 °C 24 h

Recuento placas Colonias típicas 15-300

(colonias color violeta con halo de precipitación)Confirmación 5 colonias pase a Agar nutritivo Colonias confirmadas como Enterobacterias 37 ±1 °C 24 h

oxidasa – KIA + (fermentación
glucosa)

de

37 ±1 °C 24 h Si es oxidasa – Se siembra un KIA

RECUENTO DE MOHOS Y LEVADURAS (NF ISO 7954, 1988)

10 g muestra 90 ml caldo peptona Dilución 10-1

Homogeneizar (2 min Stomacher)

Filtrar y preparar diluciones seriadas

10-2

10-310-4

1 ml

1 ml

1 ml
Suspensión madre: 15 min a Tª amb como máximo, antes de añadir el medio

X2 Añadir OGA 15-20 ml, 45-50 °C Agitar homogeneizando

25 ±1 °C 5 días

Recuento placas Colonias 15-300

RECUENTO DE COLIFORMES TOTALES EN PLACA (NF ISO 4832, 1991)

10 g muestra 90 ml caldo peptona Dilución 10-1 Homogeneizar (2 min Stomacher)

Filtrar y preparar dilucionesseriadas

10-2

10-3

10-4

1 ml

1 ml

1 ml

X2 Añadir VRBL 15-20 ml, 45-50 °C Agitar homogeneizando Añadir doble capa
Suspensión madre: 45 min a Tª amb como máximo, antes de añadir el medio

37 ±1 °C 24 h

Recuento placas Colonias típicas 15-300

(colonias color violeta rodeadas o no de halo de precipitación)

INVESTIGACIÓN DE Escherichia coli: PRESENCIA/AUSENCIA 10 g muestra90 ml caldo peptona Dilución 10-1 Homogeneizar (2 min Stomacher)

Filtrar a un tubo estéril 10 ml de muestra 10 ml caldo EC (DC) con campana Durham precalentado a 44 °C 44 °C 24-48 h POSITIVO: Presencia de gas en 1/10 parte de la campana Confirmación Prueba del indol 0,1 ml Caldo de triptona 44 °C 24 h Añadir 3 o 4 gotas del reactivo de Kovacs NEGATIVO: no anillo rojo AUSENCIA NEGATIVO: Ausenciade gas en 1/10 parte de la campana AUSENCIA

POSITIVO: anillo rojo

PRESENCIA

RECUENTO DE Staphylococcus coagulasa positivo EN PLACA (ISO 6888, 1999) 10 g muestra 90 ml caldo peptona Dilución 10-1 Homogeneizar (2 min Stomacher)

Filtrar y preparar diluciones seriadas

10-2

10-3

10-4

0,1 ml

0,1 ml

0,1 ml Baird Parker

X2 Extender el inóculo con perlas de vidrioestériles 37 ±1 °C 24 + 24 h Placas 15-150 colonias típicas y no típicas. Confirmación: inocular tubos de BHI con 3 colonias típicas y 3 colonias no típicas 37 ±1 °C 20-24 h Coagulasa

CATALASA Opcional

+
37 ±1 °C 20-24 h Coagulasa positivo

0,1 ml de cultivo (BHI) + 0,3 ml plasma de conejo

25 g muestra 225 ml agua peptona tamponada Dilución 10-1 Homogeneizar (2 min Stomacher)

0,1 ml RVS (10ml) 41,5 ±1 °C 24 ± 3 h BGA
M.K. R.V.

37 ±1 °C 18 ± 2 h

1 ml MKTTn (10 ml) 37 ±1 °C 24 ± 3 h XLD

37 ±1 °C 18 ± 2 h

M.K. R.V.

Colonias no típicas AUSENCIA

BGA: rosas y medio rosa XLD: rojas con centro negro

Colonias típicas

Confirmación Pase de 5 colonias típicas a Agar Nutritivo 37 ±1 °C 18 - 24 h Galería de confirmación API

Serología -

Reacciones bioquímicas -...
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