Lipidos


PRÁCTICA 1.

PROPIEDADES GENERALES DE LOS LÍPIDOS
INTRODUCCIÓN.

OBJETIVO
La práctica tiene como objetivo el aislamiento del colesterol de la yema del huevo, utilizando acetona como disolvente, yla determinación cualitativa del mismo mediante una reacción específica.
MATERIAL
Un huevo de gallina Tubos de ensayo
Gradilla Probetas de 10 y 25 ml
Vasos de 50 y 100 ml Pipetas de 1, 5 y10 ml
Pipetas Pasteur Varilla de vidrio para agitar
Espátula Dos tubos de centrífuga de vidrio
Centrífuga de mesa Propipetas
Baño termostático Micropipeta de 20 ml

REACTIVOS.

AcetonaColesterol al 1%
Ácido sulfúrico concentrado
Anhídrido acético

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Extracción de colesterol de la yema de huevo.
Cascar un huevo de gallina con precaución y separar laclara de la yema, teniendo cuidado de no romper ésta. Decantar la clara
Añadir sobre la yema 10 ml de acetona fría y agitar, con la varilla, hasta obtener una suspensión homogénea. Verter el contenidoen dos tubos de centrífuga y equilibrarlos. Centrifugar a la máxima velocidad de la centrífuga de mesa durante 5 a 10 minutos.
Concluida la centrifugación (cuando la centrífuga esté totalmenteparada) sacar los tubos con sumo cuidado y retirar el sobrenadante con pipeta. Guardar el sobrenadante, al que llamaremos extracto acetónico A1, y reextraer el sedimento con otros 10 ml de acetona, agitandocon la varilla y repitiendo todo el proceso. El nuevo extracto obtenido se llama extracto acetónico A2.

Los tiempos de espera en las centrifugaciones pueden emplearse en ir realizando el apartado3) de la práctica.

2. Detección cualitativa del contenido en colesterol total de los extractos.
1). Rotular adecuadamente cuatro tubos de ensayo como Blanco (B), Estándar (E), Extracto acetónico 1(A1) y Extracto acetónico 2 (A2).
2). Pipetear, en cada uno de los tubos, los siguientes volúmenes (en ml) de las soluciones reactivas:



Prueba de Salkowski

Reactivo
Blanco
Colesterol al 1%
A1
A2...