Método de coliformes nmp

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DETERMINACION DE COLIFORMES EN ALIMENTOS NÚMERO MÁS PROBABLE (NMP) 1. PRINCIPIO Este grupo de microorganismos comprende varios géneros de la familiaEnterobacteriacea; está ampliamente difundido en la naturaleza, agua y suelo. También es habitante normal del tracto intestinal del hombre y animales de sangre caliente Su presencia en alimentos es signo de malacalidad higiénica en el proceso, falta de higiene de los manipuladores, contaminación del proceso y aún de contaminación fecal. 2. APLICACIÓN El método es aplicable a harinas y productos alimenticiosde consumo humano. 3. APARATOS 3.1. 3.2. 3.3. 3.4. 3.5. 3.6. 3.7. 3.8. Lo necesario para la preparación y dilución de los homogenizados de alimentos Incubadora a 35 ºC+/-2 ºC Pipetas bacteriológicasestériles de 1 mL estériles Asa de inoculación Gradillas Cajas de petri Tubos tapa rosca de 150 x 180 mm Tubos de fermentación (Durham)

4. REACTIVOS 4.1. Caldo lactosado bilis verde brillante al 2%, 4.2. Agar eosina azul de metileno según Levine E.M.B. 4.3. Agar Endo 4.4. Agar violeta cristal rojo neutro bilis (V.R.B.A)

Industrias del Maíz S.A.

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2010/10/01 2 de 3DETERMINACION DE COLIFORMES EN ALIMENTOS NÚMERO MÁS PROBABLE (NMP) 5. PROCEDIMIENTO 5.1. General

1) Preparar las muestras y las diluciones de los homogenizados tal como se ha recomendado 6. NOTASPrueba Presuntiva 1. Pipetear 1 mL de cada una de las diluciones del homogenizado del alimento en tubos con caldo lactosado bilis verde brillante al 2 %, utilizando tres tubos por cada dilución, tener encuenta que es necesario introducir campana de durham invertida en cada tubo. 2. Agitar suavemente los tubos e incubarlos a 35 ºC +/- 2 ºC por 24 – 48 horas 3. Pasadas las 48 horas, anotar los tubosque muestran producción de gas, que se observa por el desplazamiento del medio en el tubo de Durham. Si a las 24 horas todos los tubos muestran producción de gas, continuar con la prueba confirmativa...