Maduracion Del Rna

Tema 13. Síntesis y maduración del RNA. Tipos y estructuras de RNAs. RNA polimerasas en los organismos procariotas y eucariotas. Promotores. Mecanismo de iniciación de la transcripción. Elongación. Terminación. Síntesis de RNA en seres eucariotas. Factores de transcripción. Secuencias intensificadoras. Antibióticos inhibidores de la transcripción. Procesamiento del RNA: caperuzas, colas depoliadenilato, empalme de RNA mensajero, RNA catalítico.

BIOQUÍMICA-1º de Medicina Dpto. Biología Molecular Isabel Andrés

Generalidades sobre la transcripción

¿Cómo se transcribe el DNA?
Solo se transcribe una de las dos cadenas de DNA. La única excepción son algunos virus que presentan genes solapantes. Esto es relevante porque las dos cadenas de DNA de un gen no codifican la misma proteína¿Cómo se numeran y nombran las cadenas de DNA de un gen?
Sentido de la transcripción

-10

+1

+10 cadena codificante (no es la cadena molde pero tiene idéntica
composición de bases que el RNA)

5’ T A T A A T G A G C A C A C C C T T T C C C A 3’ 3’ A T A T T A C T C G T G T G G G A A A G G G T 5’ 5’ A C C C U U U C C C A 3’

cadena sin sentido (es la que usa la RNApol como moldepara
sintetizar el tránscrito)

tránscrito de RNA

+1: primer nucleótido que se transcribe. Todos los tránscritos comienzan con A
Los nt que están en 5’ del sitio de inicio se numeran como Los nt que están en 3’ (son los que se transcriben) se numeran como +
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Tema 13

Generalidades sobre los tránscritos

1) Tipos de tránscritos
El RNA sintetizado contiene la información de un únicogen En los organismos eucariotas los genes que codifican proteínas son momocistrónicos

El RNA sintetizado contiene la información de varios genes En los organismos eucariotas los rRNAs y los tRNAs se forman a partir de tránscritos policistrónicos Los mRNAs, exceptuando los de las histonas,, provienen de genes monocistrónicos

2) Tipos de RNAs que se originan en la transcripción

mRNA >100 nt- miles nt

rRNA 120 nt 160 nt 1900 nt 4700 nt

5S 5,8S 18S 28S

tRNA 73 - 93 nt

sRNAs

scRNAs snRNAs miRNAs

100-200 nt 20-25 nt

Tema 13

3

RNA polimerasa de E.coli

“Bioquímica”. 4ª ed. Stryer, L. Ed. W.H. Reverté.1995

HOLOENZIMA

Tema 13

“Lehninger Principios de Bioquímica", 4ª ed. Nelson, D.L. y Cox, M.M. Omega. 2006

4

RNA polimerasas eucariotas

Tema13

"Bioquímica" 3ª ed. Mathews, C.K. Van Holde, K.E y Ahern, K.G. Ed. Addison Wesley. 2002.

5

Secuencias promotoras de las RNA polimerasas
PROMOTORES PROCARIOTAS PROMOTORES EUCARIOTAS

E

E

Factores de transcripción

CTF

Sp1

TBP

Secuencias Intensificadoras o amplificadoras (E ): aparecen en 5’ y 3’ del gen. Pueden estar situadas a varios miles de bp del inicio de latranscripción. Incrementan en gran medida la expresión del gen. Algunos son responsables de la expresión específica de tejido de un gen.

En los promotores eucariotas, que son mucho más complejos que los procariotas, se encuentran diferentes combinaciones de cajas reguladoras de la expresión. Las cajas GC son más frecuentes en genes constitutivos. Las cajas TATA lo son en genes inducibles. Todasestas cajas están situadas en una región de unos pocos cientos de bp situadas en 5’ del gen.

Tema 13

6 “Lehninger Principios de Bioquímica", 3ª ed. Nelson, D.L. y Cox, M.M. Omega. 2001.

Secuencias intensificadoras o amplificadoras

Las secuencias amplificadoras actúan a miles de bp en 5’ y 3’ de los promotores porque el DNA se curva y se dobla. Aumentan el nivel de transcripción de losgenes que regulan

Tema 13

“Molecular Biology of the cell”, 4ª ed. Alberts, B. Johnson, A. Lewis, J. Raff, M. Roberts, K. Walter, P. Garland Science. 2002

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Iniciación de la transcripción en organismos procariotas

La RNApol se une a la secuencia en -35

La RNApol se desliza hasta la secuencia -10 y desenrolla 17 bp para permitir la lectura de la secuencia de bases de la cadena...