Manual de bioquimica

Manual de Prácticas de Bioquímica

UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO Campus Irapuato-Salamanca
División Ciencias de la Vida

Manual de Prácticas de Bioquímica

Dr. J. Eleazar Barboza-Corona Dra. Guadalupe Ortiz Dr. Rubén Salcedo-Hernández

Dr. J. Eleazar Barboza-Corona

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INTRODUCCION
La mayoría de las técnicas experimentales y conocimientos que se hanadquirido en otros cursos son muy valiosas en el laboratorio de Bioquímica. En este laboratorio raramente se aíslan productos en gran escala, mas bien, se trabaja con miligramos o con microgramos. Los conocimientos metodológicos para estudiar las biomoléculas avanza a grandes pasos y en la mayoría de las ocasiones se requieren reactivos y equipos costosos, por lo que es mas que imposible abarcarla extensa gama de conocimientos relacionados con protocolo bioquímicos. El manual de Bioquímica lo hemos preparado con algunas prácticas sencillas, y representativas, que intentan explicar algunas de las propiedades de la biomoléculas y técnicas para estudiarlas. Se espera que el estudiante adquiera los conocimientos necesarios para entender cursos posteriores que pudiera tomar durante lalicenciatura o bien en algún postgrado dentro del área biológica. Expresamos nuestro más sincero agradecimiento a los alumnos Tania Amaral Naranjo (Ingeniería en Alimentos) y Euleterio Carrillo Serna (Ingeniería Agrícola), quiénes durante su Servicio Social Universitario colaboraron de manera extraordinaria en la preparación del presente manual. Finalmente, un profundo reconocimiento a las sugerenciashechas por los alumnos quienes han tomado el curso de Bioquímica en nuestro Instituto.

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INDICE DEL CONTENIDO Introducción Prácticas 1.Guía breve para el trabajo en el laboratorio de Bioquímica y reporte de prácticas 2. Determinación del pH y preparación de soluciones amortiguadoras 3. Separación de plásmidos en geles deagarosa 4. Determinación del tamaño de un fragmento de DNA clonado en un plásmido 5. Aislamiento de plásmidos de Escherichia coli mediante minipreparaciones 6. Propiedades iónicas de los aminoácidos 7. Identificación de aminoácidos y proteína 8. Cromatografía en capa fina y/o papel 9. Solubilidad y desnaturalización de proteínas 10. Determinación aproximada del punto isoeléctrico 11. Métodosespectofotómétricos y determinación de proteínas 12. Actividad de la amilasa sobre el almidón 13. Identificación de carbohidratos Página 2 4-5 6-9 10-11 12-13 14-15 16-18 19-21 22-24 25-26 27-28 29-31 32-34 35-38

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Práctica No.1 Guía breve para el trabajo en el laboratorio de Bioquímica y reporte de prácticas
Seguridad en ellaboratorio Deben tenerse presente las reglas generales de seguridad. Se debe estar conciente que los reactivos utilizados en el laboratorio son potencialmente tóxicos, irritantes o inflamable. Sin embargo estas sustancias son peligrosas solo cuando no se manipulan correctamente. Limpieza del material de vidrio Los resultados de los experimentos, dependen en gran parte, de la limpieza del equipo: 1)muchos reactivos se usan en miligramos o microgramos, por lo tanto cualquier contaminación,podría contribuír a un porcentaje significativo de la muestra experimental total del experimento. 2) Muchas sustancias son sensible a uno o más contaminantes, como iones metálicos, detergentes o residuos orgánicos. La libreta de laboratorio Es muy importante hacer un diagrama de flujo antes de iniciar lasesión. Los procedimientos, detalles, observaciones y resultados se deben registrar en una libreta de laboratorio mientras el experimento se esta llevando a cabo. Guía breve para el reporte de práctica Introducción Breve resumen de conceptos y/o importancia del tema. La información debe tener relevancia para la práctica y no debe ser una copia de un libro o de internet. Procurar que no exceda de...