Manual de inmunologia en laboratorio clinico

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UNIVERSIDAD DE COSTA RICA Facultad de Microbiología Instituto Clodomiro Picado

Técnicas de Laboratorio en Inmunología Clínica

Bruno Lomonte V., MQC, PhD
2009

Técnicas de Laboratorio en Inmunología Clínica
Tercera Edición, 2009

Este folleto puede descargarse gratuitamente por internet, en la siguiente dirección:

http://www.icp.ucr.ac.cr/~blomonte/

Si requiere referirse a estemanual como cita bibliográfica:

Lomonte, B. (2009) Técnicas de Laboratorio en Inmunología Clínica, 122 pp. Universidad de Costa Rica. Acceso libre en: http://www.icp.ucr.ac.cr/~blomonte/

para comentarios o sugerencias, dirigirse a: bruno.lomonte@ucr.ac.cr

INDICE
SECCIÓN I: PRUEBAS PARA LA EVALUACIÓN DEL SISTEMA INMUNE. Cap. 1 Cap. 2 Cap. 3 Cap. 4 Cap. 5 Cap. 6 Cap. 7 Aislamiento delinfocitos mediante centrifugación en gradiente de densidad ..... Cuantificación de linfocitos T mediante formación de rosetas ............................ Cuantificación de poblaciones linfocitarias mediante citometría de flujo ........... Evaluación de la respuesta mitogénica de linfocitos in vitro .............................. Cuantificación de inmunoglobulinas séricas....................................................... Determinación de la actividad hemolítica del complemento (CH50) .................. Prueba de reducción del NBT en fagocitos ......................................................... 1 7 14 22 28 39 49

SECCIÓN II: PRUEBAS PARA LA EVALUACIÓN DE LA HIPERSENSIBILIDAD. Cap. 8 Cap. 9 Determinación de IgE sérica total e IgE contra alergenos.................................. 54 Pruebas cutáneas de hipersensibilidad retardada ................................................ 62

SECCIÓN III: PRUEBAS DE APOYO DIAGNÓSTICO EN PATOLOGÍAS AUTOINMUNES. Cap. 10 Determinación de factor reumatoide ................................................................... 70 Cap. 11 Determinación de anticuerpos contra proteínas y péptidos citrulinados ............ 76 Cap. 12Determinación de anticuerpos antinucleares mediante inmunofluorescencia ..... 79 SECCIÓN IV: TIPIFICACIÓN DE HLA EN TRANSPLANTES. Cap. 13 Determinación de HLA clase I mediante microlinfocitotoxicidad ...................... 85 SECCIÓN V: PRUEBAS SEROLÓGICAS DE APOYO DIAGNÓSTICO EN ENFERMEDADES INFECCIOSAS. Cap. 14 Determinación de anticuerpos heterófilos de la mononucleosis infecciosa ......... 89Cap. 15 Determinación de anticuerpos contra la estreptolisina O .................................... 94 Cap. 16 Prueba del VDRL ................................................................................................. 99 SECCIÓN VI: OTRAS PRUEBAS SEROLÓGICAS. Cap. 17 Determinación de hormona gonadotropina coriónica ......................................... 108 Cap. 18 Determinación deproteína C-reactiva (CRP) ..................................................... 114 APÉNDICE: Reactivos ............................................................................................................................. 117

PREFACIO
El presente manual pretende proporcionar al estudiante de la carrera de Microbiología y Química Clínica la información esencial para comprender, ejecutar einterpretar un conjunto de técnicas inmunológicas de aplicación clínica, como parte de su formación en el curso MB4003, Laboratorio de Inmunología Clínica. Se asume que el estudiante posee de antemano una formación básica en Inmunología General, tanto teórica (curso MB-3510) como de laboratorio (curso MB-3511). Siguiendo la tradición de versiones anteriores, los capítulos presentan un breveintroducción que resume los fundamentos teóricos de cada técnica, seguida de una descripción general de los procedimientos, algunas notas sobre los principales cuidados e interpretación, y una bibliografía sucinta. Los reactivos utilizados y su preparación se describen todos juntos al final, en el Apéndice. Agradezco muy especialmente a los colegas y estudiantes que han hecho valiosas observaciones...
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